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- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温冷藏
- 保质期：
详见说明书
- 库存：
100
- 供应商：
上海莼试
- 规格：
50T
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
UBE2W 泛素蛋白连接酶W抗体
UNCX 同源蛋白UNCX抗体
ULBP3 UL16结合蛋白3抗体
USP22 去泛素化酶22抗体
UBF1 RNA聚合酶I抗体
SLC22A11 尿酸盐重吸收转运子1抗体
USE1 囊泡转运蛋白Use1抗体
Upstream Binding Protein 1 上游结合蛋白1抗体
UNC93B 内质网膜蛋白UNC93B抗体
UNC5B 神经突起诱导因子受体UNC5B抗体
UNC5C 神经突起生长诱导因子受体UNC5B抗体
UNC5D 神经突起生长诱导因子受体UNC5D抗体
Unc5a 神经突起生长诱导因子受体Unc5a抗体
UGCGL2 二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶2抗体
Uricase 尿酸酶
UGDH 尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶抗体
Ulex Europaeus Lectin 1 荆豆凝集素1抗体
UPK3A 尿路上皮特异蛋白3抗体
Uroplakin Ia 尿路上皮特异蛋白1a抗体
USP16 去泛素酶16抗体
URP2 整合素结合性信号分子抗体
Phospho-ATG1 磷酸化自噬相关蛋白1抗体
FGFR1 碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体
Uteroglobin 子宫珠蛋白抗体
Urocortin 尿皮质素抗体
UBOX5 泛素结合酶7相互作用蛋白5抗体
USP1 泛素特异性蛋白酶1抗体
UCP-1 线粒体脱偶连蛋白1抗体
UCP-2 线粒体脱偶连蛋白2抗体
UCP-3 线粒体脱偶连蛋白3抗体
UBXD2 UBX结构域域蛋白D2抗体
UCHL3 泛素硫酯酶L3抗体
UCHL1+3 泛素硫酯酶L1+3抗体
UBE3A 人乳头状瘤病毒E6相关蛋白抗体
UBE2Q1 泛素蛋白连接酶Q1抗体
UBE2U 泛素蛋白连接酶U抗体
Ube2L6 泛素载体蛋白L6抗体
Ube2H 泛素激活酶2H抗体
Ube2G1 泛素蛋白连接酶G1抗体
UBE2E1 泛素蛋白连接酶E1抗体
UBE2E3 泛素蛋白连接酶E3抗体
UBE2E2 泛素蛋白连接酶2E2抗体
UBE2D4 泛素蛋白连接酶D4抗体
UBE2D3 泛素蛋白连接酶D3抗体
UBE2D1 泛素蛋白连接酶D1抗体
UBE2C 泛素蛋白连接酶C抗体
SUMO-1 泛素蛋白连接酶E2I抗体
UBE2D2 泛素蛋白连接酶D2抗体
Ube2G2 泛素蛋白连接酶G2抗体
Ube2L3 泛素蛋白连接酶L3抗体
油菜内标准HMG I/Y 基因染料法PCR试剂盒Ube2N 泛素蛋白连接酶2N抗体
UGCG 葡萄糖神经酰胺合成酶抗体
UEVLD 泛素结合酶E2样蛋白抗体
Uridine Phosphorylase 1 尿嘧啶核苷磷酸化酶1抗体
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验标准曲线绘制及扩增效率计算： 可以在 excel 上进行扩增效率的计算。稀释梯度可以设置为-1 /- 2/-3，每个梯度对应的 CT 值分别为 23.69 / 27.04 / 30.27，如下图，进行标准曲线绘制。通过标准曲线可以得到线性方程（y = -3.29 x + 20.42）与 R2 值（R2 = 0.9999）。将线性方程得到的斜率（-3.29）带入扩增效率计算公式中： 即可得到扩增效率。本基因使用 Vazyme #Q711 扩增效率为 101.35%。 只有当扩增效率满足 90
Real-time qPCR手册---手把手教你从菜鸟到高手
浓度。 另一个评估PCR效率的关键参数是相关系数R2，它是说明两个数值之间相关程度的统计学术语。如果R2等于1，那么你可以用Y值（Ct）来准确预测X值（量）。如果R2等于0，你就不能通过Y值来预测X值。R2值大于0.99 时，两个数值之间相关的可信度很好。 标准偏差（standard deviation，偏差的平方根）是最常用的精确度计量方法。如果许多数据点都靠近平均值，那么标准偏差就小；如果许多数据点都远离平均值，则标准偏差就大。实际上，足够多重复次数产生的数据组会形成
研究1、 产前诊断：人们对遗传性物质改变引起的遗传性疾病还无法治疗，到目前为止，还只能只能通过产前监测，减少病婴出生，以防止各类遗传性疾病的发生，如为减少X连锁遗传病患儿的出生，从孕妇的外周血中分离胎儿DNA，用实时荧光定量PCR检测其Y性别决定区基因是一种无创伤性的方法，易为孕妇所接受。2、 病原体检测：采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测
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