转基因品系大豆A5547-127 PCR试剂盒

转基因品系大豆A5547-127 PCR试剂盒运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

Newcastle disease virus    鸡新城疫病毒抗体
NADPH    还原型辅酶Ⅱ/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸抗体
NIT2    NIT2蛋白抗体
NeuroD1    神经细胞分化因子1抗体
NFAT2    活化T细胞核因子1蛋白抗体
NMDAR1    谷氨酸受体1抗体
NRSF/REST    神经元抑制蛋白抗体
ARHGAP17    神经细胞发育相关调控蛋白抗体
IKB alpha    核因子κB抑制蛋白α抗体
Phospho-NFKB p65    磷酸化细胞核因子NF-κB p65抗体
转基因品系大豆A5547-127 PCR试剂盒Phospho-NFKB1    磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体
Phospho-eNOS     磷酸化合成酶3抗体
NUCKS1    核酪蛋白激酶和细胞周期蛋白依赖性激酶底物1抗体
NIFK    NIFK蛋白抗体
phospho-NIFK     磷酸化NIFK抗体
NFX1    核转录因子X盒结合蛋白1抗体
NIR2    膜磷脂转移蛋白1抗体
Neurotensin Receptor 1    神经降压素受体1抗体
Neurotensin Receptor 2    神经降压素受体2抗体
Neurabin 1    神经组织特异性F肌动蛋白结合蛋白抗体
NOTCH1    胞内活化的Notch1蛋白抗体
NCS1    神经钙传感蛋白1抗体
NECAB1    神经元钙结合相关蛋白EFCBP1抗体
NUMBL    膜相关蛋白样蛋白NUMBL抗体
NPEPPS    嘌呤霉素敏感性氨肽酶蛋白抗体
NSF    N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感融合蛋白抗体
NIPAL2    NIPAL2蛋白抗体
Neurotrimin    神经营养因子HNT抗体
Neurexin 1 beta    轴突蛋白1β/Neurexin 1β抗体
NMDAR3A    谷氨酸受体3A抗体
NR3B    谷氨酸受体3B抗体
NMDAR3A + 3B    谷氨酸受体3A+3B抗体
NME6    P53诱导细胞凋亡抑制蛋白α抗体
NT5C1A    胞质5'核苷酸酶1A抗体
NOC2L    NOC2家族样蛋白抗体
Nitrotyrosine    硝基酪氨酸抗体
NUPR1    核蛋白p8抗体
NSPL2    神经内分泌特异性蛋白2抗体
NOX5    还原型辅酶Ⅱ氧化酶5/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸抗体
Nucleostemin    核干细胞因子抗体
NPC1    尼曼匹克C1前体蛋白抗体
NET1    去甲转运蛋白/神经递质去甲体抗体
NUP88    核孔复合体蛋白88抗体
NOL8    核仁蛋白8抗体
Nck beta    NCK衔接蛋白2抗体
NPHS2    肾小球裂孔膜蛋白PDCN抗体
NMT1    豆蔻酰基转移酶1抗体

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。