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- DNA甲基化检测技术技术手册
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- 2026年01月04日
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DNA甲基化检测
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每例
DNA甲基化一直以来都是表观遗传学领域研究的重点之一。DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase, 缩写DNMT）的作用下，基因组DNA序列上CpG岛的二核苷酸5′端胞嘧啶转变为5′甲基胞嘧啶（5′ methylcytosine, 缩写5mC）。这种DNA修饰的方式并未改变基因的序列, 但能改变某些基因的表达，从而影响生物学功能。
甲基化可以改变 DNA 片段的活性而不改变序列。当位于基因启动子中时，DNA 甲基化通常起到抑制基因转录的作用，DNA甲基化通过募集参与基因阻遏的蛋白质或通过抑制转录因子与 DNA 的结合来调节基因表达。在发育过程中，基因组中的DNA 甲基化会随着新的 DNA 甲基化和去甲基化的动态过程而发生变化。因此，分化细胞产生稳定和独特的 DNA 甲基化模式以调节组织特异性基因转录表达。DNA 甲基化对于正常发育是必不可少的，并与许多关键过程相关，包括基因组印记、X染色体失活、对转座因子的抑制、衰老和致癌作用等。
DNA甲基化研究的检测手段
DNA 甲基化检测目前主要通过亚硫酸氢盐转化后的测序或 PCR 方法来进行，亚硫酸氢盐可将未甲基化胞嘧啶转化成尿嘧啶，甲基化的胞嘧啶不受影响。
常用的4种DNA甲基化检测的方法
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文献和实验一、 什么是DNA甲基化在甲基转移酶的催化下，DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基，形成5－甲基胞嘧啶，这常见于基因的5'-CG-3'序列。大多数脊椎动物基因组DNA都有少量的甲基化胞嘧啶，主要集中在基因5'端的非编码区，并成簇存在。甲基化位点可随DNA的复制而遗传，?因为DNA复制后，甲基化酶可将新合成的未甲基化的位点进行甲基化。DNA 甲基化是表观遗传学的重要部分，同组蛋白修饰相互作用，通过改变染色质结构，调控基因表达。在哺乳类细胞或人体细胞中，DNA 甲基化与细胞的增殖、衰老
2.2.10 DNA微阵列法 Yan等2001年[40]将以分子杂交为基础的微阵列技术应用于DNA甲基化检测中，这种方法是基于杂交的寡核苷酸微阵列，是一种在基因组中寻找新位点的方法。包括用于整个基因组范围内扫描的差异甲基化（DMH）杂交（Huang等1999年[41]）和用于检测某个位点的甲基化特异性微阵列MSO（Gitan等2002年[42]）。前者类似于mRNA表达谱或cDNA微阵列，是CpG岛微阵列，后者类似于寡核苷酸微阵列，是针对CpG二核苷酸位点的甲基化特异性寡核苷酸微阵列[26
摘要： DNA甲基化是表观遗传学(Epigenetics)的重要组成部分，在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育以及人类肿瘤发生中起着重要作用，是目前新的研究热点之一。随着对甲基化研究的不断深入，各种各样甲基化检测方法被开发出来以满足不同类型研究的要求。这些方法概括起来可分为三类：基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找。本篇将主要介绍目前存在的大部分DNA甲基化研究方法，并对其相关特性进行了简要分析与总结。 关键词：表观遗传学；DNA甲基化；甲基化研究
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