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- 2025年07月12日
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免疫共沉淀Co-IP
免疫共沉淀（Co-Immunoperecipation）是基于抗体和抗原之间结合的专一性用于研究蛋白质相互作用的经典方法。原理简介：细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在许多蛋白与蛋白质之间的相互作用体被保留下来，利用兴趣蛋白单一结合性抗体免疫沉淀该蛋白，与兴趣蛋白结合的其它蛋白也可以同时被沉淀下来，沉淀得到的蛋白复合体能够通过变性凝胶电泳分离开来，以此分离相互作用蛋白或者定性分析几种相互作用蛋白之间的作用力大小。服务案例SV40大T抗原和P53蛋白相互作用的免疫共沉淀流程简介：将大T抗原表达载体和myc tagged-P53表达载体共转染进入细胞柱表达后，提取总蛋白，加入抗myc抗体充分反应，用Protein A agarose捕获抗原抗体结合物，洗脱后蛋白上清同时用抗大T抗原抗体和抗myc抗体Western Blot检测。可根据Western Blot光密度结果定量分析不同表达体中大T抗原和P53蛋白相互作用力大小。
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文献和实验—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞，PMSF（Amresco，cat:329-98-6），cocktail（上海晶莱生物），脱脂奶粉（cat:66196131T），β-actin（上海晶莱生物）。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime)，细胞刮，4 度离心机（eppendorf，centrifuge
了一线技术支持常被问到的问题，希望这篇纯干货能帮助大家顺利升级打怪，早日驾驭 IP、co-IP。 IP、co-IP、pull-down 简介 IP（Immunoprecipitation），免疫沉淀：是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等基质上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的一种方法 Co-IP（co-Immunoprecipitation），免疫共沉淀： co-IP 是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法，其基本实验流程和IP类似，通过使用诱饵蛋白（IP 中的抗原，bait protein）特异
紫叶竹韵 做IP，之后Western 分析，看到有两条带，在25和50KD左右，应该是抗体的两条带，但是我的目的蛋白也是52KD的，这该怎么区分呢。 woxingwosu 最好是选择与做IP不同来源的抗体来做（比如说IP用鼠的抗体，WB就用兔的抗体），这样就不会检测到抗体的两条带。 如果没有不同来源的抗体的话，就要做IP的时候尽量少放点抗体，跑胶跑得远一点，使得目的蛋白能够被看到，不过由于你的蛋白是在是太接近重链
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