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免疫组化IHC检测
免疫组化(immunohistochemistry)是利用抗原和抗体特异性结合原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(酶、荧光素、金属离子、同位素等)显色或发光来检测组织细胞内抗原,对其进行定性、定量及定位的检测。在特别是肿瘤的临床诊断和用药方面应用突出。客户提供:制作样本(冰冻切片、石蜡切片、组织印片和细胞爬片),其中石蜡切片可由公司以客户来源的组织或石蜡包埋组织制作;一抗
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文献和实验相关实验
免疫组化(IHC)实验流程。
免疫组化背景深、特异性差?IHC Troubleshooting 指南
区域很深,周围组织也出现不同程度染色。 新抗体建议做梯度预实验,例如围绕说明书推荐浓度设置几个稀释梯度,在目标信号清楚、非目标区域背景最低的条件下确定工作浓度。 如果某个抗体需要用非常高的浓度才能看到目标信号,先检查抗原修复和抗体是否经过IHC-P验证。 5. 封闭不充分和二抗交叉反应 封闭步骤主要用于降低抗体与组织中非目标位点的结合。常用正常血清或BSA等封闭液,具体体系与二抗检测系统匹配。 二抗本身也可能造成背景。可以设置去掉一抗、只加二抗和后续显色体系的阴性对照。如果这张切片仍出现明显信号
【求助】用免疫组化的方法检测出来的NF-kB是指活化了的NF-kB吗?
songyong 各位亲们:请问用免疫组化的方法检测出来的NF-kB 是已经活化了的NF-kB呢?还是无活性的也包括进去啦?谢谢 ronaldo_zj 体内的细胞信号通路研究确实不好评价,不过就NF-kappaB这个通路来说,我个人觉得可以通过一下几个方法来衡量: 1. 经典的NF-kappa B的活化往往都是NF-kappaB(包括p50、p65、p52等)作为转录因子活化而转位至细胞核内发挥转录调节功能
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