- ￥6296.47
- Sigma-Aldrich
- AL0103000
- 2025年07月16日
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- 库存：
6
- 英文名：
ALiCE® Cell Free Protein Expression Kit (Plant Cell Lysate)
- 供应商：
Merck
- 保存条件：
−70°C
- 规格：
6 x 50 μL;
创新的蛋白表达系统，不依赖细菌或细胞，表达蛋白的产量最大提高到3mg/ml。在表达膜蛋白、有毒蛋白、二硫键蛋白、抗体片段等方面具有独特优势。可以使用线性模板，不需要繁琐的载体构建过程，实现蛋白的高通量合成和筛选。
传统的体内表达系统都是利用 DNA 重组实现目的蛋白的表达。然而体内表达一直存在表达量有限，培养成本高、周期长、不正确的蛋白糖基化，还存在内毒素、包涵体，操作技术要求高等瓶颈。
无细胞表达系统是以细胞裂解液为基础，在试管中进行的蛋白表达。开放性系统赋予蛋白表达的灵活性，无细胞蛋白表达系统在表达膜蛋白、有毒蛋白、二硫键蛋白、抗体片段等方面具有独特优势。
无论是简单还是复杂的蛋白质，无细胞蛋白质合成系统均可实现高产量。
ALiCE"无细胞蛋白质表达试剂盒是一种独创的真核无细胞系统，可利用植物细胞裂解物在批量处理模式下将蛋白质产量提升到前~所未~有的3mg/mL。ALiCE"的强大之处在于完整的细胞器，可利用活性线粒体提供持续的能量供应。此外，微粒体（内质网重组形成的囊泡）还能够对复杂蛋白质进行折叠和翻译后修饰，包括二硫键和糖基化。
特点和优势
1. 仅需简单的 一步法，可将蛋白质产量提升到 3mg/mL；
2. 价格合理，但蛋白质产量高出30倍·技术经过500多种蛋白质的反复验证；
3. 工作流程经过简化，只需极少的操作即可开始反应，并且包含的去污剂有助于轻松回收蛋白质（包括微粒体中的蛋白质）。
图 1.
荧光素酶来源于海洋桡脚类动物Gaussia princeps，它是一种球状蛋白（19 kDa），其活性形式具有五个二硫键。以在25°C下孵育48小时、70% RH、500 rpm 的条件生产微粒体蛋白质，并通过His-Tag 亲和色谱进行纯化。通过催化腔肠素氧化形成coelenteramide，同时产生发光反应（Aem）=475nm，进行活性测定。荧光素酶在纯化过程中被浓缩，产生更高的任意发光值。
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文献和实验蛋白表达系统在表达膜蛋白、有毒蛋白、二硫键蛋白、抗体片段等方面具有独特优势。由于可以使用线性模板，利用PCR方法就可以轻松实现在目的基因两侧加入需要的转录和翻译所需的因子，不需要繁琐的载体构建过程。线性模板的使用还可以实现蛋白的高通量合成和筛选。 ALiCE® Kit无细胞蛋白质表达试剂盒 (植物细胞裂解液) (Sigma货号：AL0103000) ALiCE®无细胞蛋白质表达试剂盒是一种独创的真核无细胞系统，可利用植物细胞裂解物在批量处理模式下将蛋白质产量提升到前所未有的3mg/mL。ALiCE®
得率和翻译的保真度。 3)TNT偶联网织红细胞裂解物能得到多少量的蛋白质？ 蛋白质的得率和模板有关，在50ul的反应体积中正对照质粒产生150-500ng的蛋白质 4)一次反应用多少量的DNA？ 标准步骤用1ug的DNA。用0.2-2.0 ug的DNA可得到满意的结果。DNA的量大于1ug不增加蛋白质的量。 5)标准兔网织红细胞裂解物系统能代替TNT兔网织红细胞裂解物系统？ 不，两个系统的设计不同。如将提供的裂解物系统替换，则不能获得
膜蛋白表达和分析的新技术—从基因设计、蛋白质制备到功能研究和蛋白结晶 膜蛋白是当今最重要的药物靶标蛋白，对膜蛋白功能和结构的全面理解是研制相关新药的基础。下面的讲座将介绍膜蛋白分析的完整工作流程策略，从合理的基因设计、蛋白质制备到功能研究和蛋白结晶。同时将为您介绍这些步骤的新技术、新方法，以及成功实验的数据。 讲座将给出优化序列基因在不同表达系统（真核生物、哺乳动物细胞体系和无细胞体系）中的表达数据。另外，我们将介绍快速、简便的亲和性膜蛋白溶解试剂，以及后续纯化操作
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