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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
2
- 供应商:
上海研卉生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 英文名:
Tubulite™ Red *Cell-Permeable*
- 规格:
100 Slides
活细胞微管蛋白染料Tubulite Red *细胞渗透性
Tubulite™ Red Cell-Permeable
货号:23718
产品优势
高结合特异性:精准标记微管蛋白,避免与肌动蛋白等细胞骨架交叉标记。
适用范围
用于标记活细胞微管蛋白
产品介绍
Tubulite™ Red是一种用于活细胞微管蛋白结构荧光可视化工具,该细胞膜穿透性探针无需固定细胞即可实现微管动态的实时成像,支持持续监测微管聚合与组织过程。其红色荧光特性与好的细胞穿透性使其适用于多色成像实验(如与GFP及DAPI等核染料共标记)。探针进入细胞后,经胞内酯酶水解去除疏水性封闭基团,生成带电荷的膜不渗透形式,从而稳定保留于细胞内。
注意事项
1.该探针可能干扰微管活性和细胞分裂等关键功能,因此不建议用于动态细胞过程研究;
2.由于固定处理会导致荧光淬灭,也不适用于固定细胞成像。
样品分析方案
概述
1.将待测化合物处理的细胞密度调整至5×10⁵-1×10⁶个cell/mL
2.制备 Tublite Red 工作溶液并加入到细胞中
3.37°C 下孵育 60 分钟
4.使用 Cy3 滤光片的荧光显微镜检测荧光强度。
注意:此方案为通用指南,需根据具体实验需求调整参数。
细胞准备
每样本准备1mL预热培养基/缓冲液,调整细胞密度至5×10⁵-1×10⁶个细胞/mL
每个样本,在 1 mL 温热培养基或缓冲液中制备细胞,密度为5 × 105-1 × 106个细胞/mL。
注意:不同细胞系需优化合适的接种密度
原液配制
除非另有说明,所有未使用的母液应分装后-20℃保存,避免反复冻融
Tubulite Red 原液 (100X)
向 Tublite Red瓶中加入 100 µL DMSO(未提供,需自备),充分混匀。
注意:分装未使用Tubulite Red 原液于-20℃保存,避免反复冻融。
工作溶液配制
Tubulite Red 工作溶液 (1X)
取10 µL Tubulite™ Red原液与1 mM ReadiUse™丙磺舒(AAT货号20061,需自备),加入1 mL HHBS缓冲液(含20 mM Hepes的Hanks缓冲液,AAT货号20011,需自备)或您选用的其他缓冲液中,充分混匀
注意:1.推荐现配现用,工作液可稳定数小时
2.按每样本100μL工作液计算,请根据实际需求调整 Tublite Red 和 ReadiUse 丙磺舒的浓度浓度
操作步骤
1.根据需要准备细胞样本。
2.除去细胞生长培养基,用 PBS(未包含)或您选择的其他缓冲液清洗细胞。
3.将 100 µL Tublite Red 工作溶液加入细胞中,37°C 孵育 60 分钟。
注意:请务必根据细胞类型和浓度调整孵育时间
4.除去工作溶液,用 PBS 或自选缓冲液清洗细胞两次。
5.用含有 1 mM 丙磺舒的 HHBS(或您选择的缓冲液)覆盖细胞。然后,使用 Cy3 滤光片的荧光显微镜检测荧光强度。
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