LLC-PK1猪肾近曲小管上皮细胞丨LLC-PK1 细胞价格

LLC-PK1 猪肾近曲小管上皮细胞
一、细胞介绍

该细胞源自3~4周龄的Hampshire猪肾组织，可产生纤溶酶原激活物。

二、细胞特性

1) 来源：猪肾

2) 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3) 含量：>1x106 个/mL

4) 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格：T75瓶或者1mL冻存管包装

三、运输和保存

(1)使用T25瓶充液发送活细胞。

(2)收到细胞后，请先在显微镜下检查细胞生长状态，并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后，再次检查细胞状态。若状态良好，可按照以下细胞培养步骤进行细胞后续处理操作。若发现可疑污染物，请及时与我们取得联系。

细胞用途：仅供科研使用。

四、细胞培养步骤

1.培养基及培养冻存条件准备

1) 准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, bing tong酸钠 0.11g/L)，90%;优质胎牛血清，10%。

2) 培养条件： 气相：空气，95%;二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

2.细胞处理

1) 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

3.对于贴壁细胞，传代可参考以下方法

a. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

d. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。