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- IMMOCELL
- 厦门
- IM-M057
- 2025年09月25日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Mouse Embryonic Fibroblasts
- 库存：
9999
- 供应商：
厦门逸漠生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
详询
- 细胞类型：
贴壁生长
- 品系：
小鼠细胞株
- 组织来源：
胚胎
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
小鼠
- 免疫类型：
详询
- 细胞形态：
成纤维细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 器官来源：
详询
- 运输方式：
复苏发货或干冰发货（顺丰快递）
- 年限：
长期
- 生长状态：
正常
- 规格：
1*10^6
细胞介绍
1972年从C3H小鼠胚胎细胞中分离建立;在同系小鼠体内不能成瘤，未发现自发转化;化学制剂很容易引起该细胞发生转化。
细胞特性
1) 来源：小鼠胚胎
2) 形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3) 含量：>1x106 个/mL
4) 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存
(1)使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。
(2)收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至250px培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备Eagle's Basal培养基(Eagle's Basal medium:GIBCO,货号21010-046, 添加NaHCO3 1.5g/L, 2 mM L-谷氨酰胺，及EBSS)，90%;优质胎牛血清，10%，添加1% PS。
2) 培养条件： 气相：空气，95%;二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理
1) 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
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，这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。 3、血清主要作用： 提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。 提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（氢化可的松、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。 提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。 提供促接触和伸展因子
