- ￥885
- 翌圣生物（Yeasen）
- 10299ES40
- 上海翌圣
- 2025年10月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Hieff® Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL)
- 保质期：
有效期2年
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
40000U
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
| Hieff® Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL) |
10299ES40 |
40,000 U |
985.00 |
| 10299ES42 |
400,000 U |
8765.00 |
|
| 10299ES83 |
1,600 KU |
30675.00 |
|
| 10299ES08 |
5 mL |
32865.00 |
产品描述
Hieff® Fast T4 DNA Ligase是一款可用于NGS建库过程中DNA片段和接头连接的单酶产品，该产品已经过高通量测序验证，质量优异。本酶具有高效的连接能力，非常适合复杂结构核酸片段的连接，比如华大平台的Ω接头。对于无需进行体系调整的客户，推荐选购Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module (Cat#12604)，其核心组分即为本品。
产品组分
| 组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|||
| 10299ES40 （40,000 U） |
10299ES42 （400,000 U） |
10299ES83 （1,600 KU） |
10299ES08 （5 mL） |
||
| 10299-A |
Hieff® Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL) |
100 µL |
1 mL |
4 mL |
5 mL |
| 10299-B |
10 × T4 DNA Ligase Buffer |
250 μL |
5 × 500 μL |
10 mL |
12.5 mL |
单位定义
在20 μL的连接反应体系中，6 μg的λDNA-Hind Ⅲ分解物在16℃下反应30 min时，催化50%以上的DNA片段发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
运输与保存方法
干袋运输。-20℃保存，有效期2年。
注意事项
1. T4 DNA Ligase对物理变性敏感，混合时轻轻颠倒试管摇匀，请勿剧烈振荡；
2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；
3. 本产品仅做科研用途；
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 目前主流的合并法DNA建库试剂盒，其末端修复和加A处理后一般不纯化，直接进行接头连接。本试剂盒可与主流的商业化末端修复加A体系兼容，进行接头连接。反应体系请参考如下配制，涡旋瞬离后置于20℃，反应15 min即可。
表1 Adapter Ligation体系
| 名称 |
体积（μL） |
| dA-tailed DNA |
60 |
| 10 × T4 DNA Ligase Buffer |
10 |
| 50% PEG 6000 |
10* |
| DNA Adapter |
X** |
| Hieff® Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL) |
1-5*** |
| ddH2O |
To 100 |
【注】：*试剂盒内未提供50% PEG 6000，需自行准备。
**接头用量参考表2。
***Hieff® Fast T4 DNA Ligase用量可根据需要添加1-5 μL。
2. Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer；用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表2列举了使用本试剂盒，不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。
表2 500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度
| Input DNA |
Adapter : Input DNA摩尔比 |
Input DNA |
Adapter : Input DNA摩尔比 |
| 1 μg |
10:1 |
50 ng |
100:1 |
| 500 ng |
20:1 |
25 ng |
200:1 |
| 250 ng |
40:1 |
1 ng |
200:1 |
| 100 ng |
100:1 |
500 pg |
400:1 |
【注】：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]。
【接头添加计算举例】：当Input DNA为100 ng，Input DNA长度为300 bp时，接头应该添加多少？
第一步，计算Input DNA摩尔数。公式：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]；
Input DNA摩尔数（pmol）=100 ÷（0.66×300）=0.5 pmol；
第二步，计算接头添加摩尔数。根据表2查询接头添加比例；
根据表2，查得Input DNA 100ng时接头添加比例100:1，则接头添加摩尔数=100×0.5 pmol=50 pmol；
第三步，计算接头添加体积。接头浓度=15 μmol/L（如使用其他接头，浓度需要依据其他接头浓度参数）；
接头添加体积=接头添加摩尔数（50 pmol）÷接头浓度（15 μmol/L）=3.34 μL（注：15 μmol/L=15 pmol/μL）
综上，接头可添加3.4 μL。（注：接头最大加入体积不超过5 μL）
HB220628
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文献和实验Ligation of DNA with T4 DNA Ligase
recombination and DNA synthesis. DNA ligase from E. coli is a polypeptide with a molecular weight of 74,000 and is NAD-dependent. T4 DNA ligase is the product of gene 30 of the T4 phage, has a molecular weight of 68,000, and is ATP-dependent. Both enzymes
相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
连接酶，反应10分钟。平滑末端连接：在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA 连接酶反应2小时，或者加入1µl高浓度T4 DNA 连接酶反应10分钟。 另外，NEB的快速连接试剂盒 (Quick Ligation Kit, NEB #M2200V [15个反应])是独有的可以在室温5分钟条件下连接平滑末端和粘性末端的试剂盒。 图1：在25°C条件下，用1 unit（1:400稀释后取1 µl）T4 DNA连接酶连接λDNA/Hind Ⅲ片段(4-碱基粘端)不同反应时间的结果。 图
