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- 翌圣生物（Yeasen）
- 14956ES60
- 上海
- 2025年12月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
E. coli DNA ligase (100 U/μL)
- 保质期：
2年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
100 μL
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格 |
| E. coli DNA ligase (100 U/μL) |
14956ES60 |
100 μL |
1125 |
| 14956ES03 |
1 mL |
8995 |
|
| 14956ES10 |
10 mL |
71955 |
产品描述
E. coli DNA ligase可以催化相邻DNA链的5’-PO4末端与3’-OH末端形成磷酸二酯键，对平末端底物DNA几乎无明显连接活性。其反应的最适pH为7.5-8.0（Tris-HCl buffer），反应需NAD作为辅酶。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比，本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA。另外，本款产品不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接反应。
该酶可以用于NGS甲基化建库中进行连接反应，另外也可以用于Okayama-Berg法克隆cDNA。
产品组分
| 组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
||
| 14956ES60 |
14956ES03 |
14956ES10 |
||
| 14956 |
E. coli DNA ligase (100 U/μL) |
100 μL |
1 mL |
10 mL |
单位定义
在20 μL的连接反应体系中，6 μg的 λ DNA-Hind III 在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位（U）。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。
注意事项
1）Buffer 在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！
使用方法
1. 在无菌微量离心管中配制以下反应体系：
| 组分 |
体积 |
| DNA |
1 μg |
| 10× E. coli DNA ligase Buffer (Cat#15822) |
2 μL |
| E. coli DNA ligase (100 U/μL) |
0.6 μL |
| 10× BSA（0.05%） |
2 μL |
| 灭菌水 |
Up to 20 μL |
2. 16℃温育1 小时或过夜。
HB220926
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文献和实验的特异性低， DNA、低聚核苷酸和核苷 - 5′， 3′－二磷酸都是它的基质。因能将〔 5′ 32P〕胞苷 - 5′， 3′－二磷酸结合于 RNA 的 3′－ OH末端，所以也用于标记 RNA末端或确定碱基顺序。
相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA连接酶有两种，一种是从大肠杆菌中分离得到的，称为E.coli DNA连接酶，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，不能将双链DNA片段平末端之间连接起来。 另一种是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4DNA连接 酶，它既可以缝合双链DNA片段互补的黏性末端又可以缝合双链DNA片段的平末端。我们通常使用的就是此中酶。
Ligation of DNA with T4 DNA Ligase
recombination and DNA synthesis. DNA ligase from E. coli is a polypeptide with a molecular weight of 74,000 and is NAD-dependent. T4 DNA ligase is the product of gene 30 of the T4 phage, has a molecular weight of 68,000, and is ATP-dependent. Both enzymes
