上海信帆生物代理销售“明胶酶谱法试剂盒”,试剂盒多可以检测750个样本。现货供应,灵敏度高,
提供售后技术指导,欢迎联系。试剂盒适用于血清,细胞,上清液等!
使用该试剂盒发表的文献:

描述:基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)以无活性的酶原形式分泌,活化后能够降解
细胞外基质的胶原蛋白,又称胶原酶。通过影响细胞外基质,胶原酶参与胚胎发育、形态发生、组
织重塑等过程,并参与炎症、肿瘤、心血管、神经等许多疾病过程。血浆与组织中的MMP-2、MMP-9
参与各种生理与病理过程,其在临床诊断和治疗中的意义日益受到重视。
本试剂盒采用酶谱法(zymography)检测MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一种广为使用的、基
于SDS-PAGE 电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法,其灵敏度可达1 nM,高于ELISA 方法2,其
基本原理和程序是:制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE 凝胶,含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电
泳, 电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer 孵育,凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深
染,形成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色
而形成透亮区域,从而能同时指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶谱)及活性。
MMP透明条带的大小、位置和酶谱的图例。注意因为样品未还原和加热变性,条带位置并不对应推算的蛋白分子量。下图1,正常血浆样品阳性对照可能出现的反相显示的透明条带位置:66kDa(MMP-2),72kDa(proMMP-2),87kDa(MMP-9),92kDa(proMMP-9),注意血浆中只有很少量的激活状态的66kDa的MMP2,增加上样量在ProMMP2下面隐约可见(最右侧泳道)。
如下图2,不同于正常血浆MMP酶谱,每种组织样品(如牙周膜韧带组织)都具有自己特定的MMP活性酶谱,部分proMMP9(92kDa)可能会结合一个25kDa微球蛋白形成MMP9复合物,条带位置约125-130kDa,其二聚体条带大约在215-225kDa位置(图中并未显现),多聚体条带位置240kDa,严格说他们都是MMP9复合体,但也有人称其为proMMP-9。注意在这种组织中activeMMP9活性低,但activeMMP2活性高,与血浆MMP活性酶谱形成了鲜明的对比
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