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二乙酸荧光素(FDA)

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  • 西格
  • XG-X10617
  • 进口、国产
  • 2025年07月09日
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    • 供应商

      上海西格

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      1g/5g

    二乙酸荧光素(FDA)操作步骤:
    1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;
    2、用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞;
    3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液;
    4、将待染色细胞稀释至所需浓度(方法及浓度范围与细胞计数相同);
    5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴,室温下染3—5min;
    6、染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察;
    7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽。本产品仅供科研活细胞不着色并保持正常形态,有光泽;
    8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目;
    9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率

    产品名称:二乙酸荧光素(FDA)
    英文名称:

    产品规格:1g/5g
    发货周期:13
    产品性状:白色固体粉末
    产品保存:避光-20℃保存,一年有效
    产品说明:
    二乙酸荧光素(Fluorescein Diacetate,FDA)是一种常用的培养动植物细胞以及植物细胞原生质体的生活力鉴定染料,其染色机理也利用了死活细胞在代谢上的差异:FDA本身不产生荧光,也无极性,能自由渗透出入完整的细胞膜。当 FDA 进入活细胞后,被细胞内的脂酶分解,生成有极性的、能产生荧光的物质——荧光素,该物质不能自由透过活的细胞膜,积累在细胞膜内,因而使有活力的细胞产生绿色荧光;而无活力的细胞因不能使 FDA 分解,而无法产生荧光。FDA 也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别是 488nm 530nm
    使用方法:
    (1)配制溶液:将 FDA 溶于酮中,配成浓度为5 mg./ml的溶液,置于 4℃冰箱中保存。染色时将 FDA 加入到细胞液中,使其终浓度为100μg/ml
    (2)活细胞染色:取处于对数增长期的细胞液,离心浓缩,生理盐水清洗1次,加入 FDA,在室温黑暗处放置 5 min 染色;染色后离心,生理盐水清洗1-2次,后用蒸馏水悬浮细胞,涂片观察。
    (3)死亡细胞胞染色:取鲁哥氏溶液固定的死亡细胞按活细胞相同的方法进行染色。
    (4)观察:用荧光显微镜观察和拍照(明场和荧光分别拍照,物镜使用 20×)。活细胞被 FDA 染成亮绿色,当细胞膜受损,荧光素无法在细胞内累积,而使细胞无法发出荧光。活性高的细胞发出强烈的绿色荧光,活性弱或死亡的细胞发光较弱或不发光。
    注意事项:
    (1)使用方法可依据细胞的具体情况适当调整。
    (2)鲁哥氏即 Lugols 溶液,也就是碘液。取 6 克碘化钾溶于 20 毫升蒸馏水中,搅拌到溶解后,加入 4 克碘,等碘充分溶解,再加入 80 毫升蒸馏水,贮存在棕色
    试剂瓶内。
    细胞生物学研究有以下几个方面:
    细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
    ①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
    ②生物膜与细胞器的研究;
    ③细胞骨架体系的研究;
    ④细胞增殖及其调控;
    ⑤细胞分化及其调控;
    ⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
    ⑦细胞的起源与进化;⑧细胞工程.
    细胞生物学研究的常用技术有哪些:
    1.显微技术:包括显微观察,显微操作.
    2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
    3.细胞工程:细胞培养。
    具有显著特点:
    灵敏度高,数据可靠,重现性好
    操作简便,省时省力
    水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞
    无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低
    为1瓶溶液,毋需预制,即开即用
    适合于高通量药物筛选
    细胞培养的优点:
    1.研究的对象是活细胞
    在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
    2.研究条件可以人为控制
    pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
    3.研究的样本可以达到比较均一性
    通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
    4.研究内容便于观察、检测和记录本产品仅供科研
    采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
    以下是
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