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        Fluorescein Diacetate (FDA)染色

        互联网

        7317
         
        <center> <font><font><b><font>Fluorescein Diacetate (FDA</font> </b> )</font> </font></center>

         

        1. Place pollen on slide.

        2. Incubate in humid chamber (wet Whatman in Tupperware) ~ 30 min.

        3. Add drops of FDA (2mg/ml in acetone) to Pollen Growth Media (~/ml) until it becomes turbid.

        4. Add 1 drop to pollen.  Incubate 10’

        5. Add slide and view under FITC.
         

         

        <center> <p> <font><b><font>Pollen Growth Media</font> </b> </font></p> </center>

        2X

        For 4 Liters:
        1360 g sucrose (34%)
        16 ml of 1 M CaCl2 (4mM)
        26 ml of 0.5 M Boric Acid (3.25 mM)
        pH to 7.5 (~ 2.24 ml of 4 M KOH or 2.24 mM)
         

        1X

        For 1 Liter:
        17% sucrose (170 g)
        2 mM CaCl2 (2 ml of 1 M CaCl2)
        1.625 mM Boric Acid (3.25 mL of 0.5 M Boric Acid)
        pH to 7.5 with 4 M KOH (1.12 mM; 0.28 ml of 4 M)
        bring to volume

        <center> <p>  </p> </center>
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