CEN2p（Cy5）鱼探针/CEN2p（Cy5）鱼探针/CE

如何做好 Southern 杂交？

加入：Labeling 5× buffer 10 μl（含有随机引物）dNTPmix 2 μl(含 dCTP、dGTP、dTTP 各 0.5 mM)BSA（小牛血清白蛋白）2 μl[ a -32 P]dATP 3μlKlenow 酶 5 U3. 将变性模板 DNA 加入到上管中，加 ddH2O 至 50 μl，混匀。室温或 37 ℃ 1 hr。4. 加 50 μl 终止缓冲液终止反应。标记后的探针可以直接使用或过柱纯化后使用。由于 a -32 P 的半衰期只有 14 天，所以标记好的探针应尽快使用。探针的比活性最好

Use of Chromophoric Ligands to Visually Screen Co‐Crystals of Putative Protein‐Nucleic Acid Complexes

of complex and protein alone with the naked eye or a light microscope, crystals of covalently Cy5?labeled DNA can be directly used for X?ray diffraction data collection. Curr. Protoc. Nucleic Acid Chem. 46:7.15.1?7.15.8. © 2011 by John Wiley & Sons

【交流】MICROARRAY入门教材

为引物进行逆转录反应时标记cDNA。在某些条件下，用随机引物进行cDNA合成也可用于标记，尽管此方法不是对所有微阵列设计都适用。例如，由3’端序列组成的微阵列更适用于oligo-dT反转录的cDNA探针，由完整cDNA序列或含预测开放阅读框架序列构成的微阵列对两种逆转录方法都适用。样品还可在未标记的第一链合成后进行第二链合成时再标记。以下列出三种方法。 荧光染料：很多荧光染料标记的双脱氧核苷酸可由商业渠道取得。出色的结果是用Cy3-和Cy5-dUTP获得，两者激发光谱分得很开，用多种酶均可获