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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 英文名:
PeriodateLysineParaformaldehyde Fixative Solution
- 保质期:
保存期限半年。
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
常温运输4℃避光保存
- 规格:
250mL
英文名称:Periodate-Lysine-Paraformaldehyde Fixative Solution
产品规格:250mL
发货周期:1~3天
PLP固定液即过酸钠-赖氨酸-甲醛固定液,又可称为Nakane-McLean固定液。该固定液的作用机制是借助于过酸氧化组织中的糖类形成醛基,通过赖氨酸的双价氨基与醛基结合,从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是由蛋白质和糖两部分构成,抗原决定簇位于蛋白部分,故该固定液有选择性地使糖类固定,这样既稳定了抗原,又不影响其在组织中的位置关系。
产品特点:
1.较适于富含糖类的组织,对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。
2.即开即用,用户不需单独购买各种试剂来配制。
3.固定时间一般需要12-24小时。
产品组成:
成分
溶液A
溶液B
成分C
说明书
储存条件:常温运输,4℃避光保存,保存期限半年。
使用方法:
一、配制PLP 固定液(以配制50mL 固定液工作液为例,如果用户需要配制其他体积,请按比例增加或减少各成分的用量)
1.取 30mL溶液A加入到50mL的聚乙离心管中。
2.继续向离心管中加入10mL的溶液B,混合均匀。
3.称取 0.085g成分C的干粉,加入到上步混合液中,搅拌直至干粉溶解,即得到PLP固定液工作液。
注:此固定液最好临用前配制,否则时间长了会产生一些沉淀,亦会发生氧化反应,从而影响后续组织固定实验。
二、固定液的使用(以皮肤活组织切片为例)
4.取皮肤活组织,切成小长方块。
5.置入PLP 固定液工作液中,固定12-24小时(根据样品材料、大小不同,固定时间或固定温度可能会有较大差异)。
6.用 0.1 M自备的PBS溶液漂洗固定后的组织样品。
7.将样品置于自备的20%甘油或0.1 M PBS溶液中,4℃下保存过夜。
8.将上述样品转移至-20℃下保存备用(20%甘油或0.1 M PBS溶液应淹没组织样品,以防组织样品暴露在液面外被冻伤),或用冷冻的滑动式切片机将固定后的组织样品切成薄片,光镜或电镜下观察组织。
注意事项:
1.本产品对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2.组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3.固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
4.固定后的组织样品在转移到-20℃下保存之前,4℃下最长可保存1周。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
注意事项:
PLP固定液(NakaneMcLean固定液) 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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指直接装填到色谱柱中作为固定相的具有活性的多孔性固体物质。固体固定相大体可分为三类: 第一类是吸附剂。如:分子筛、硅胶、活性炭、氧化铝等; 第二类是高分子聚合物。如国内的GDX型高分子多孔微球,国外Porapak系列等; 第三类是化学键合固定相。在气相色谱中,通常是将固定液涂敷在载体表面上。采用化学键合固定相分析极性或非极性物质通常都能够得到对称峰,柱效很高,固定相的热稳定性也有所改善。 一般是一种高沸点的有机物的液膜,通过对不同
固定液 fixative, fixative solution
。渗透性很弱。另外不适宜用于细胞化学和组织化学方面的研究。在把材料放入固定液中后,固定液内外产生浓度梯度,这对保持形态是不利的。为了防止这一缺点,可把材料作成小块和薄片,同时并混以醋酸或酒精等,以提高对原生质的通透性。但是这类固定液一般具有溶解脂类的性质,会促使细胞内部结构发生变化,或因固定液急剧浸入细胞,使细胞内低分子物质流失,因此这与形态的保存是矛盾的。用固定液对材料进行固定,一般容易引起原生质收缩。各种固定液均各有其本身的缺点,对材料的固定状态也每有不同,但如果根据不同目的采取适当的处方和调整
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