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羧基磁珠(Mag-COOH)
5ml
羧基磁珠(Mag-COOH)产品描述
Mag-COOH系列磁珠具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富羧基官能团、单分散性等特点,能够在特殊化学试剂(如EDC)的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物配体共价偶联到微球表面,是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。纳米-亚微米级的粒径,使其具有更快的磁响应性同时保持微球良好的分散性、极低的非特异性吸附和更丰富的结合位点等特性,能便捷高效地与多种生物配体(蛋白、多肽、寡聚核苷酸、药物分子等)进行高载量结合,可作为良好的基础材料进行包被、吸附、化学改性等后续处理。
羧基磁珠(Mag-COOH)产品信息
羧基磁珠(Mag-COOH)产品优势
1. 磁珠粒径为纳米-亚微米尺度,比表面积大,丰富的结合位点,加强与配体的特异性结合。
2. 超顺磁性和高磁响应性,节省操作时间。
3. 良好的分散性和重悬性,提高操作的便捷性。
4. 良好的物理化学稳定性,保障重复性效果。
羧基磁珠(Mag-COOH)磁珠与生物分子的偶联方法(以蛋白A/G为例)
1. 磁珠预处理:混匀磁珠后,取100 μL Mag-COOH磁珠到1.5 mL离心管中,磁性分离去除上清液,用200 μL MEST溶液(0.1 MMES,pH 6.0,0.05% Tween 20)进行磁性分离洗涤2次,然后移除上清液;
2. EDC活化:迅速加入新鲜配制的 100 μLEDC溶液(10 mg/mL,以上述MEST溶液作分散剂)和100 μL NHS(10 mg/mL,以上述MEST溶液作分散剂)溶液到装有磁珠的离心管中,漩涡混匀使磁珠充分悬浮, 25℃活化60 min,该期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);经过上述步骤之后,磁珠表面的羧基已经活化,可以与带有伯氨基的生物配体进行共价偶联。(活化状态不宜长时间保存,建议立即进行偶联)
3. 磁珠偶联:磁性分离去除上清液,加入50 μg~200 μg生物配体(合适用量及浓度需要根据具体实验进行优化,保持溶液pH≈8.0,可加入0.05%Tween 20以提高磁珠分散性,避免缓冲体系中存在除生物配体以外含有伯氨基的试剂),轻柔地混匀,25℃偶联2 h,或25℃偶联1 h后放置4℃静置过夜,偶联期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);
4. 封闭: 将EP管置于磁分离架上磁性分离去除上清液,加入200-500 μL Tris-HCl (0.1M,pH=8.0)重悬磁珠,25℃反应3 h封闭磁珠表面非特异性吸附位点,封闭后,再加入200-500 μL BSA/PBS溶液(pH 7.2,含1% BSA)二次封闭1h,该期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);
5. 保存: 离心管置于磁性分离器上磁性分离去除上清液,每次用200 μL PBS溶液(pH 7.2)或保存溶液洗涤3次后, 重新悬浮于保存溶液中(可根据需要来确定保存溶液的加入量,以调整偶联配体磁珠的浓度),保存于4℃。如果固定的生物配体稳定,可以在保存溶液中加入0.02%(w/v)(NaN3)作为抑菌剂。
羧基磁珠(Mag-COOH)注意事项
1. 磁珠保存在ddH2O中,冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 在使用本产品前,请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。
3. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
4. 为保证最佳的实验结果,请选用合适的配体进行共价偶联反应。
5. 本产品仅供研究使用。
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