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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
20%乙醇4-8℃
- 保质期:
3年
- 英文名:
Streptavidin-Berpharose FF
- 库存:
大量
- 供应商:
北京博尔西科技有限公司
- 规格:
1ml预装柱
链霉亲和素琼脂糖凝胶FF
(Streptavidin Berpharose FF)
1.产品介绍
链霉亲和素琼脂糖凝胶FF(Streptavidin Berpharose FF)是一种将链霉亲和素(Streptavidin)键合在琼脂糖凝胶微球上形成的亲和层析分离介质,利用生物素与链霉亲和素配体之间的相互作用分离纯化生物素或生物素化的抗原、抗体、核酸等物质。
链霉亲和素与生物之间的亲和力很强,需要在变性条件下洗脱,这个特性可用于抗原与抗体的分离,如将生物素化的抗体结合在凝胶上,然后利用抗原抗体的亲和特性纯化无生物素化的抗原,抗原洗脱时抗体不会被洗脱。链霉亲和素对亚氨基生物素的亲和力相对较弱,可以在pH9.5-11.0结合,pH4.0时洗脱,不需要使用变性剂所以能更好的保持亲和素偶联物的活性。
2.规格
1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml、20ml、100ml、500ml
3.产品性能
| 性能 | 指标 |
| 基质 | 6%琼脂糖微球 |
| 配基 | 链霉亲和素(Streptavidin) |
| 配基密度 | 5mg/ml |
| 载量 | ≥300nmol生物素/ml ≥6mg生物素化蛋白/ml |
| 粒径 | 45-165μm |
| 流速/*大流速 | 15-100 /700 cm/h |
| 耐反压 | 0.3MPa |
| pH稳定范围 | 短时间pH2-11 长时间pH4-9 |
| 储存缓冲液 | 20%乙醇 |
| 储存温度 | 4-8℃ |
①缓冲液:
(1)纯化生物素或生物素化物质
结合缓冲液:20mM NaH2PO4, 150mM NaCl, pH7.4
洗脱缓冲液:8M 盐酸胍,pH1.5
(2)纯化2-亚氨基生物素或2-亚氨基生物素标记的物质
结合缓冲液:50mM 碳酸铵,500mM NaCl,pH10.0
洗脱缓冲液:50mM 乙酸铵,500mM NaCl,pH4.0
(3)纯化抗原或抗体
结合缓冲液:20mM NaH2PO4,150mM NaCl,pH7.4
洗脱缓冲液:100mM 甘氨酸-盐酸,pH3.0
注:
用于生物素化的抗体纯化未生物素化的抗原(或生物素化的抗原纯化未生物素化的抗体)有2 种方法,①可先在游离状态下抗原与抗体结合,然后当样品纯化即可;②也可以将生物素化的抗体(或抗原)先结合柱上,然后对应的未生物素化的抗原(或抗体)当样品纯化。
②样品准备
上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处理样品。并且上柱前应过0.45μm 滤膜或高速离心去除不溶物。
③样品纯化
(1)取适量的链霉亲和素琼脂糖凝胶FF 装入合适的层析柱中,用结合缓冲液平衡5 个柱体积,建议流速为100cm/h。
(2)将准备好的样品缓慢上柱,为保证样品与链霉亲和素充分结合,应控制好上样流速,建议流速为15-50cm/h。
(3)上样后用结合缓冲液平衡10 个柱体积以上,或平衡至基线,洗去杂质,推荐流速为100cm/h。
(4)用洗脱缓冲液洗10-20 个柱体积,建议流速为100cm/h,收集的洗脱液应立即调节pH 至稳定范围,并根据需要置换缓冲液。
(5)洗脱目的蛋白后的柱子应立即用中性的结合缓冲液平衡,并用20%乙醇保存柱子,或进行下一次纯化。
6. 注意事项:
1) 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
2) 去除一些沉淀或变性物质,建议使用下面的方法用2倍柱体积的0.1M NaOH或6M盐酸胍或8M尿素溶液进行清洗,然后立即用 5倍柱体积的PBS,pH7.4清洗。去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质3-4倍柱体积70%乙醇或2倍柱体积的1% TritonX-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH 7.4清洗。
3) 本产品保存条件为20%乙醇,4~8℃。
4) 2-25℃,常压,避光运输。
5) 仅供科研实验使用。
相关产品目录:
链霉亲和素(Streptavidin)系列
★链霉亲和素(r-SA)
★核心链霉亲和素(rc-SA)
★核心链霉亲和素(rc-SA)(点膜、包被专用:强吸附、高稳定性)
★辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(HRP-SA)
★荧光素标记链霉亲和素(FITC-SA)
★链霉亲和素琼脂糖凝胶FF(Streptavidin Berpharose FF)
亲和层析填料(预装柱)
★蛋白A琼脂糖凝胶 FF (Portein A Berpharose FF)
★蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein G Berpharose FF)
★耐碱蛋白A琼脂糖凝胶 FF (rat-Portein A Berpharose FF)
★蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein AG Berpharose FF)
★镍-琼脂糖凝胶FF (Ni- Berpharose FF)
★链霉亲和素琼脂糖凝胶 FF (Streptavidin Berpharose FF)
★Strep-Tactin琼脂糖凝胶 FF (Strep-Tactin Berpharose FF) (StrepII标签蛋白纯化)
★肝素-琼脂糖凝胶 FF (Heparin- Berpharose FF)
★大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 FF (STI- Berpharose FF)
内毒素清除琼脂糖凝胶 (Endotoxin Removal Reagent Berpharose)
GST-琼脂糖凝胶FF (GST Berpharose FF)
钴-琼脂糖凝胶FF (Co- Berpharose FF)
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文献和实验【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。
[img][/img]Protein A 柱之进化 Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质,能特异性地与人和哺乳动物抗体(主要是IgG)的Fc区结合。因而,将Protein A 与琼脂糖凝胶以一定的方式结合,可制备用于抗体纯化的亲和填料。 早期的Protein A柱结合的都是天然Protein A。天然Protein A由5个IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成,分子量约42KD,结构如图1所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强,可以吸附大量的lgG。但同时,天然
色谱。是最有效的手段,关键了解目标物质的特性以便选择合适的亲和色谱填料。二、主要用途介绍1.去除内毒素内毒素也叫热源,一般是磷脂A ,糖类和蛋白,在中性条件下带有负电荷。内毒素的磷脂部分有很强的疏水性,一般的在高盐情况下它们会聚合,所以不能用疏水色谱,如果蛋白本身的疏水性强,可以选择把目标蛋白结合到疏水色谱填料(苯基琼脂糖凝胶FF ,丁基琼脂糖凝胶FF )上和内毒素分离。内毒素因为带有很强负电荷,如果目标蛋白带阳电荷,用DEAE 琼脂糖凝胶FF 或Q 琼脂糖凝胶FF 把内毒素吸附,达到去除内毒素的目的
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