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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
23
- 英文名：
Anti-Akt(pan) Monoclonal Antibody
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
瓶
| 产品名称 | Anti-Akt(pan) Monoclonal Antibody说明书 |
| 英文名称 | Anti-Akt(pan) Monoclonal Antibody |
| 货号 | YS-D10853 |
英文名称: Anti-Akt(pan) Monoclonal Antibody
宿主: Mouse
别名: Akt(pan)
应用: WB IP
稀释比例: WB 1:1000.
蛋白分子量: 48/51/54/56kDa
Gene ID: 207;208;10000
保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
储存液: Buffer: PBS with 0.02% sodium azide, 50% glycerol, pH7.3.
纯化方法: Affinity purification
使用方法：
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
下列是Anti-Akt(pan) Monoclonal Antibody说明书的相关产品：
QuiescinQ6/QSOX1巯酶1抗体进口/国产人抗髓磷脂抗体IgA(AMAIgA)ELISA试剂盒562-10-7
LEU5/RFP2白血病相关蛋白5抗体进口/国产人抗腮腺管抗体(anti-parotidductAb)ELISA试剂盒2440-22-4
SAPK3/MAPK12应激活化蛋白激酶3抗体（丝裂原活化蛋白激酶12）进口/国产人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)ELISA试剂盒155633-54-8
SCGB3A1结合珠蛋白家族3A1抗体进口/国产人抗人绒毛膜促性腺激素抗体(A小鼠整合素α-IIb(Itga2b/CD41)免疫试剂盒 1,3,5-三(二基胺基)-1,3,5-六化三嗪
大鼠子宫成纤维细胞培养试剂盒CDKN2A/p16INK4a转化神经突起蛋白
小鼠整合素α5(Itgax/CD11c)免疫试剂盒 3-溴-5--2-羟基吡啶
大鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒CDKN1BNPIP样蛋白1
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大鼠卵巢成纤维细胞培养试剂盒C9orf171 老年性痴呆蛋白APH2
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)免疫试剂盒 4
Anti-Akt(pan) Monoclonal Antibody说明书复壁碳纳米管1030nm(直径),12μm(长度)质量>95%(TPOMethod)CarbonNanotubeMultiwalled1030nm(diam.),12µm(length)
Scolopendra蜈蚣PCR鉴定试剂盒
爪哇根Rhizopusjavanicus大鼠肠巨噬细胞完全培养
Fructusmume乌梅PCR鉴定试剂盒
复壁碳纳米管2040nm(直径),12μm(长度)质量>95%(TPOMethod)CarbonNanotubeMultiwalled2040nm(diam.),12µm
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文献和实验指仅对一种抗原决定基的纯粹的抗体。这类抗体不可能通过将抗原 胞的 Hybridoma，在试管内制成了纯粹的单克隆抗体。用某种抗原使动物产生免疫感应，对应于抗原之不同部分可制成各种不同的抗体复合体。然而，因为一个产生抗体的细胞，只能产生一种抗体，所以骨髓肿瘤细胞与产生抗体细胞间的细胞杂种，可形成边产生抗体边增殖的 hybridoma，将每个杂种细胞进行克隆（无性繁殖系）培养，则一个克隆的细胞群只由单种类产生同一抗体的细胞所组成，这样得到的就是单克隆抗体。此抗体在测定
Monoclonal Antibody Production
Order 6 six week old Balb/C mice and let the ARC know they are coming.Have your antigen ready for when they arrive.Once they get there earmark the mice and perform a pre-bleed on them to be used as an ELISA control for monitoring the titer
yukituki 最近做Akt的WB遇到了问题： 我用的是CST的Akt抗体以及pAkt抗体，染小鼠组织（肝，肾，脾，肺，脑等）。 5%BSA（TBST稀释）4度封闭过夜 之后一抗是5%脱脂牛奶稀释，1：500，过夜，二抗1：2000稀释，2-3h 染出来的片子很脏，而且Akt勉强可以见到，但是pAkt没染出来条带 提组织用的是RIPA（每100mg用500ul），加了PMSF以及NaF，冰上
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