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大量
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诺博莱德
浓度
250~1,000μg/ml
贮存溶液
Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
EDTA 1mM
起源:Plasmid pBR322
链长:4,361 bp
| D0084 | BL21(DE3)pLysS受体菌 | NobleRyder | 1ml | 100.00 |
| D0083 | BL21(DE3)受体菌 | NobleRyder | 1ml | 100.00 |
| D0080 | DH5α受体菌 | NobleRyder | 1ml | 100.00 |
| D0085 | HB101受体菌 | NobleRyder | 1ml | 100.00 |
| D0098 | IPTG 溶液(200mg/ml) | NobleRyder | 1ml/5ml | 60.00/160.00 |
| D0082 | JM109受体菌 | NobleRyder | 1ml | 100.00 |
| D0110 | LB培养基 | NobleRyder | 10L | 260.00 |
| D0063 | PBR322 | NobleRyder | 25ug(0.5OD) | 100.00 |
| D0064 | pET-32a(+) | NobleRyder | 25ug(0.5OD) | 560.00 |
| D0061 | pUC18 | NobleRyder | 25ug | 100.00 |
| D0062 | PUC19 | NobleRyder | 25ug(0.5OD) | 100.00 |
| D0081 | TOP10受体菌 | NobleRyder | 1ml | 100.00 |
| D0096 | X-gal溶液(20mg/ml) | NobleRyder | 1ml | 40.00 |
| D0099 | 氨苄青霉素溶液(100mg/ml) | NobleRyder | 10ml | 100.00 |
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文献和实验Back to Basics: pBR322 and Protein Expression Systems in E. coli
plasmid-borne elements and their interaction with the particular host strain will influence the overall expression system and final productivity (3 ) (see Chapters 1 –3 ). Plasmid vector pBR322 (4 ) is a well-established multipurpose cloning
1),尿嘧啶合成酶基因(URA3),亮氨酸合成酶基因(LEU2),组氨酸合成酶基因(HIS4)等。 3) 生化标记基因。这类标记基因的表达产物可催化某些易检测的生化反应,常用的基因有β-半乳苷酶基因(lacZ)、葡萄糖苷酸酶基因(GUS)、氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)。 为了进一步说明载体的结构和各个结构的功能,下面举一个在基因工程中使用比较频繁的大肠杆菌载体—pBR322作为例子。 大肠杆菌载体pBR322 载体pBR322是由Bolivar 等人于1977年构建的。该载
都中止。但松弛型质粒仍继续进行复制。因此在增殖松弛型质粒时,总是要让宿主菌经氯霉素处理(在培养液中加入适量的氯霉素)抑制蛋白质的合成。图23-3 pBR322的基本结构(一)大肠杆菌质粒应用的最广泛的质粒载体是pBR322,它属松弛型质粒,有抗氨苄青霉素和抗四环素两个抗性基因可作为标记基因,有许多种常用的限制酶的切点。它全长4352个核苷酸,排列顺序已全部测定,基本结构如图23-3。当需要用pBR322来克隆BamHI酶切的一个DNA片段时,一般的做法是如图23-4所示。图23-4 pBR322克隆
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