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GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同,在100ml琼脂糖胶溶液中加入5µl GoldView™即可。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,也可用于染RNA。
由于未发现GoldView™有致癌作用,且灵敏度与EB相当,将有可能逐渐取代EB而得以广泛应用。
概 述
GoldView™是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoldView™与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而且也可用于染RNA。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均为阴性;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。因此用Goldview™代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法
1. 将100ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)在微波炉中融化。
2. 加入5µl GoldView,轻轻摇匀,避免产生气泡。
3. 冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4. 电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照相记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可;若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项
1. 胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2. 加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响,但不明显。
3. 通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoldView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
4. 虽然未发现GoldView有致癌作用,但对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴上手套。
| 货号 | 产品名称 | 品牌 | 规格 | 价格(元) |
| R0920 | 10×MOPS 缓冲液 | NobleRyder | 500ml | 240.00 |
| R0926 | 4×甲醛变性胶上样缓冲液 | NobleRyder | 1ml | 80.00 |
| D0031 | 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(19:1) | NobleRyder | 100ml/500ml | 80.00/280.00 |
| D0020 | 5×TBE 缓冲液 | NobleRyder | 500ml | 120.00 |
| D0021 | 50×TAE 缓冲液 | NobleRyder | 500ml | 160.00 |
| D0032 | 6×DNA loading buffer | NobleRyder | 5ml | 42.00 |
| R0921 | 6×RNA loading buffer | NobleRyder | 1ml | 40.00 |
| D0025 | GoldView核酸染色剂(EB替代品) | NobleRyder | 1ml/100ml | 80.00/4000.00 |
| D0028 | SYBR Green I(10000×)电泳用 | NobleRyder | 100ul | 420.00 |
| P0350 | 剥离硅烷/疏水硅烷(Repel—Silane) | NobleRyder | 250ml | 200.00 |
| P0360 | 亲和硅烷bind-silane | NobleRyder | 100ml | 280.00 |
| D0102 | 快速电泳缓冲液(20×) | NobleRyder | 500ml | 100.00 |
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文献和实验前不久一个网友问到我这个问题,自己了解的也少,因此这几天找了找,现在把自己找到的一些东西贴下来供大家参考。 以下是师兄前辈们总结的几种EB替代品: sybr-green---- 不稳定,易降解 goldview ----宣称无毒,不灵敏,回收连接不好,荧光易猝灭 gelred ----
均匀沉入加样孔内.②在电泳中形成肉眼可见的指 示带,可预测核酸电泳的速度和位置.③使样品呈色,使加样操作更方便. 染色剂 核酸电泳后,需经染色后才能显现出带型,最常用的是溴化乙锭染色法,其 次是银染色. 溴化乙锭(ethidium bromide,EB)是一种荧光染料,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对 之间,在紫外线激发下,发出红色荧光.根据情况可在凝胶电泳液中加入终浓度为 0.5ug/ml的EB,有时亦可在电泳后,将凝胶浸入该浓度的溶液中染色10~15min.琼脂 糖
。GelRed----真正安全无毒的核酸凝胶染料GelRed and Gelgreen 核酸凝胶染料最灵敏 , 最稳定的核酸凝胶染色试剂,是真正的EB替代产品!由美国BIOTIUM公司技术专家研发的GelRed 和GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的高效荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成任何环境污染。目前大多数商业化的核酸染料(凝胶染色试剂)总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不完全令人满意:EB (溴化乙啶)作为目前使用最广泛
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