免疫印迹转印垫 

Western 实验步骤

80 V)要低于分离胶电泳电压(建议 110-150 V)，以达到更好的浓缩效果，使样品进入分离胶时被压缩在同一水平线上。电泳直至溴酚蓝染料前沿下至凝胶末端处停止电泳，电泳时间约 2-3 小时。 电转（湿转法） 1） 电泳结束后取出凝胶，在电泳缓冲液中（冷藏的）漂洗数秒。按“三明治”模式，打开电转印夹，每侧垫上一块专用的转膜液浸泡透的海绵垫，再各放一块转膜液浸透的蛋白转移垫(定性滤纸），将凝胶平放在阴极侧滤纸上，最后将转膜液浸透并事先用甲醇浸泡的 PVDF 膜平放在凝胶上，去除气泡，夹好电转印

western blotting的转膜步骤

相关专题   下面的步骤适用于通过XCell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。 I. 所需材料： •Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051）•电泳后的迷你胶（mini-gel）（最大的尺寸9cm*9cm）•预先切割好的印记膜： 硝酸纤维素（Cat. no. LC2000或LC

（共享）免疫印迹具体操作步骤

。4、 将凝胶、硝酸纤维素膜、滤纸和支持垫浸入缓冲液中并保证其完全浸泡。小心地将支持垫中的气泡赶出（在转印缓冲液中完成组 装可确保夹层组合内不会再有气泡。）5、 将转印夹层组合进行安装，使所有的部分保持湿润，务必使凝胶和滤纸之间接触良好。具体操作见下面步骤：6、 打开转移盒并放置浅盘中，用转移缓冲液将海绵垫完全浸透后将其放在转移盒壁上，海绵上再放置一张浸湿的3MM Whatman 滤纸；7、 小心将凝胶放置于滤纸上，避免气泡（用转移缓冲液润湿并戴手套）8、 以转移缓冲液湿润胶面，小心将硝酸