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500ml
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文献和实验或终止内源性或外源性细胞内分解酶的反应,防止组织细胞自溶,更是为了保存组织或细胞内的抗原性,使抗原不失活,不发生弥散。不同的抗原对固定液耐受程度不同,因而要选择合适的固定剂。 现在常用的固定剂有中性甲醛液,4% 多聚甲醛-磷酸盐缓冲液。有些固定剂对特殊组织有更好效果,如苦味酸对于头皮、指甲固定有软化效果,Helly 固定液对于胰岛和垂体效果较好,PLP 固定液对于含糖组织抗原保存更好。 脱水、石蜡包埋和制片 脱水用梯度乙醇(由低到高)充分脱水,对于一些易脆的组织(如肝、脾等)应减少高浓度酒精里
甲液13ml,乙液87ml,混合即可KH2PO40.59g,Na2HPO412H2O 10.39g-500ml孵育液临用前配制:取m/15,PH=7.6缓冲液89ml,逐滴加入六偶氮付品红液6ml,充分混合后,再滴入2%醋酸萘酯2.5ml,充分混合后调整pH至5.8-6.4以下石蜡切片,冰冻切片可以用4%多聚甲醛固定,先固定与切片后固定均可二石蜡切片1. 将被检组织置于4℃10%中性甲醛钙溶液中固定,过夜2. 移入4℃holt氏阿拉伯胶糖液至少24hr3. 置于4℃50%丙酮1hr4.
1. 标本固定——不仅仅是「切一切」和「泡一泡」温柔地取材:大刀阔斧取材的同时,视组织如珍宝,莫挤压组织,轻柔取材和镊取。尽量避开坏死区域。太大太厚的组织不利于均匀一致的固定,实质组织取材厚度应小于 5 mm。新鲜的固定液: 固定液 10% 中性缓冲福尔马林 (NBF) 需新鲜配置,商用型固定液注意其标注的有效期,避免使用过期变质的固定液。充分及时地固定:固定液要充足,其与组织的体积比最好大于等于 20 倍;取材后即刻固定。固定时需将瓶口封住,避免甲醛挥发。组织的固定时间不宜过长,一般过夜(12~24
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