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无
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100
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上海晅科生物科技有限公司
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100ml
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文献和实验重要。1.转膜时间2. 转膜过程环境温度3. 转膜缓冲液使用次数4.转膜缓冲液中甲醇比例(v/v)(三)一抗使用*使用IRS1(150kDa)、pPERK(125kDa)和内质网应激XBP1(29/55kDa)抗体等检测小鼠肝组织探讨一抗在多种条件下对结果影响(IRS1,pPERK和 XBP1 用于 WB 检测难以出现清晰条带,因此选择合适的一抗及孵育条件就很关键)。1.一抗稀释溶剂2.一抗稀释比例3.一抗孵育时间(四)二抗使用*高浓度的二抗会导致大量非特异性结合,造成WB背景较深。1.二抗稀释比例 (洗释
条件至关重要。1. 转膜时间2. 转膜过程环境温度3. 转膜缓冲液使用次数4.转膜缓冲液中甲醇比例(v/v)(三)一抗使用* 使用 IRS1(150kDa)、pPERK(125kDa)和内质网应激 XBP1(29/55kDa)抗体等检测小鼠肝组织探讨一抗在多种条件下对结果影响(IRS1,pPERK 和 XBP1 用于 WB 检测难以出现清晰条带,因此选择合适的一抗及孵育条件就很关键)。1. 一抗稀释溶剂2. 一抗稀释比例3. 一抗孵育时间(四)二抗使用* 高浓度的二抗会导致大量非特异性结合,造成 WB
推荐的阳性对照物和处理方法。2、一抗稀释和/或孵育使用推荐的封闭剂(5% BSA 或 5% 脱脂奶粉),以推荐的稀释度溶解于 TBST 中,在 4°C 下,过夜孵育一抗。使用备选封闭剂,如明胶、血清、无蛋白封闭剂、酪蛋白、或混合封闭剂,可能降低靶标信号强度。如需单个抗体的优化结果,请查询产品数据表找到推荐的稀释缓冲液。3、SDS-PAGE 凝胶选择一般来说,推荐采用 Tris-Glycine 凝胶。但是,对于高分子量蛋白质,我们推荐采用 Tris-Acetate 凝胶和相关缓冲液。蛋白
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