- ￥875
- 翌圣生物（Yeasen）
- 13280ES60
- 上海
- 2025年12月30日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Hieff® Multiplex PCR Master Mix
- 保质期：
1年
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
-20℃储存
- 规格：
100T
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
| Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 13280ES60 | 100 T | 875.00 |
| Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 13280ES76 | 500 T | 3165.00 |
产品描述
本产品适用于多重PCR实验。Hieff® Multiplex PCR Master Mix为多重PCR酶制剂与扩增缓冲液的2×预混液，可以快速便捷地用于PCR反应，具备高均一性、高特异性和高灵敏度的特点，可以对20对及以上的引物进行特异、均一地进行扩增反应。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
| 13280ES60 (100T) | 13280ES76 (500T) | ||
| 13280-A | Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 2×1.25 mL | 10×1.25 mL |
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃储存，有效期1年。
反应体系
| 组分 | 体积 μL | 终浓度 |
| Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 25 | 1× |
| Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
| 模板DNA | DNA总量：1 ng-200 ng | - |
| 无菌超纯水 | up to 50 | - |
2）每条引物的浓度可在0.1 μM-0.5 μM范围内进行调整。
3）Hieff® Multiplex PCR Master Mix中已经包含扩增所需要的酶、dNTP、盐离子等，无需额外添加。
扩增程序
| 循环步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94 | 1 min | 1 |
| 变性 | 94 | 30 sec | 15-45 |
| 退火 | 50-60 | 60 sec | |
| 延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
| 终延伸 | 72 | 10 min | 1 |
2）使用本产品获得的扩增产物无需添加上样缓冲液，可直接上样用于电泳检测。
3）延伸时间以最长扩增片段为准，可适当延长延伸时间，但要避免过长时间的延伸带来的非特异性扩增。
实验案例分享
以人基因组DNA为模板，使用10对引物进行多重PCR反应，分别扩增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
反应体系配制
| 组分 | 体积 （μL） | 终浓度 |
| Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 25 | 1× |
| Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
| 模板DNA | DNA总量：1 ng-200 ng | - |
| 无菌超纯水 | up to 50 | - |
扩增程序
| 循环步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94 | 1 min | 1 |
| 变性 | 94 | 30 sec | 35 |
| 退火 | 60 | 60 sec | |
| 延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
| 终延伸 | 72 | 10 min | 1 |
电泳检测
2%琼脂糖凝胶；电压130 V；电泳时间30 min。
实验结果
Lane1-2：10重PCR产物
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文献和实验，切除标签，并通过质谱仪检测。如果你们实验室没有质谱仪，而又想开展多重分析，那么下面的一些方案可能适合你。 罗氏应用科学部的Light Cycler 480 Probes Master Mix能成功支持4重反应，甚至达到5重。这是一种即用型的反应预混液，包含了FastStart Taq 热启动型DNA聚合酶，它能减少非特异产物的形成，从而显著改善PCR的特异性和灵敏度。 Bio-Rad的iQ Multiplex Powermix能检测最多4个目标，即使它们的表达量相差106倍
Troubleshooting for PCR and multiplex PCR
seaprately using the same PCR program. If one of the primer pairs yields unspecific products, keep the cycling conditions constant and change other parameters as mentioned above (#1 and #2). Mix equimolar amounts of primers and run the multiplex reaction
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