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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (No Dye)
- 保质期:
有效期2年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
1mL
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
| 2×Hieff® Robust PCR Master Mix (No Dye) |
10105ES03 |
1 mL |
65.00 |
| 2×Hieff® Robust PCR Master Mix (No Dye) |
10105ES08 |
5×1 mL |
265.00 |
产品描述
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (No Dye)选用改造的Taq DNA Polymerase,添加强力延伸因子、扩增增强因子以及优化的缓冲体系,扩增速度和扩增产量较普通PCR Mix有了质的飞跃。扩增速度可达15 sec/kb,适用于快速PCR反应,1 kb以内的极限扩增速度可达5 sec/kb,大幅节省PCR反应时间。预混液中含有dNTP、Mg2+,使用时只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤。体系中加入的保护剂使得 Master Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A,可轻松克隆至T载体。本产品中不含染料,PCR产物需加入Loading buffer 后进行电泳。
PCR反应体系(推荐冰上配制)
| 组分 |
体积 |
终浓度 |
| 模板DNA |
适量 |
- |
| Primer正向 (10 μM) |
2.5 μL |
0.5 μM |
| Primer反向 (10 μM) |
2.5 μL |
0.5 μM |
| 2×Hieff® Robust PCR Master Mix(No Dye) |
25 μL |
1× |
| H2O |
to 50 μL |
- |
【注】:使用前请务必将其彻底混匀。
a)模板使用量:人基因组DNA:30-100 ng;大肠杆菌基因组DNA:10-100 ng;λDNA:0.5-5 ng;质粒DNA:0.1-10 ng。
b)Mg2+浓度:本产品中含有3 mM的MgCl2,适合大部分PCR反应。
PCR扩增条件
| 循环步骤 |
温度(℃) |
时间 |
循环数 |
| 预变性 |
94 |
3-5 min |
1 |
| 变性 |
94 |
10 sec |
30-35 |
| 退火 |
55 |
20 sec |
|
| 延伸 |
72 |
15-30 sec/kb |
|
| 终延伸 |
72 |
5 min |
1 |
【注】:a)退火温度:请参考引物的理论Tm值,退火温度可设置低于引物理论值1-2℃。
b)延伸速度:长度1 kb以内的基因可选择5-15 sec/kb。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期2年。
注意事项
1)PCR反应体系需在冰上配制,体系混匀后快速置于PCR仪进行反应。
2)本产品PCR产物不适用于聚丙烯-酰胺凝胶电泳。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4)本产品仅作科研用途!
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| 产品名称 |
货号 |
规格 |
| 10101ES80/90 |
1000/5×1000 U |
|
| 10102ES03/08 |
1/5×1 mL |
|
| 10103ES03/08 |
1/5×1 mL |
|
| 10106ES03/08 |
1/5×1 mL |
|
| 10108ES03/08 |
1/5×1 mL |
|
| 10149ES03/08 |
1/5×1 mL |
HB210805
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文献和实验-crack to help liberate the DNA. Check that the solution actually freezes. Overlay with a drop of mineral oil and incubate at 60°C for 60 minutes, followed by 95°C for 15 minutes. Cool to 4°C. Pipette 22.5 l of PCR master mix
关于扩增酶和产物大小应注意: •对于小于4kb的产物使用Taq DNA聚合酶或Platinum Taq DNA聚合酶 •对于小于12kb的产物使用Platinum Pfx Taq DNA聚合酶或Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity •对于大于12kb的产物使用ELONGAE® Enzyme Mix •对于一步法RT-PCR,如果产物小于3.5kb,使用Taq
of source DNA material • It does not necessarily require the use of radioisotopes or toxic chemicals • It involves preparing the sample DNA and a master mix with primers[Primer: A short DNA or RNA fragment annealed to a singled-stranded DNA










