His-Tag蛋白纯化磁珠（钴离子） IDA-Cobalt

产品名称：His-Tag蛋白纯化磁珠（钴离子） IDA-Cobalt
单位:瓶
His-tagProteinPurification磁珠（组氨酸标签蛋白纯化琼脂糖磁珠）是专为高效、快速纯化组氨酸标签蛋白而设计的一种新型功能化材料，可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白，显著地简化了纯化工艺，降低了设备需求，适合科研和工业领域便捷快速地进行组氨酸标签蛋白的纯化工作。对比传统的过柱层析纯化方式，His-tagProteinPurification磁珠通过磁性分离方式纯化组氨酸标签蛋白，无需对粗蛋白样品进行多次费时费力的离心、过滤步骤，无需装柱和过柱层析，无需昂贵的柱层析设备，在1小时内便能便捷地获得高产量和高纯度的目的蛋白，且能轻松实现多样品平行处理，显著提高了工作效率，大大降低了设备、时间和人工成本.本产品系列包括镍离子（Nickel）和钴离子（Cobalt）两种金属离子螯合磁珠。它们在目标蛋白结合量及所得目标蛋白纯度上有所差异，一般推荐客户使用镍离子螯合磁珠，大多数情况下能满足客户对蛋白载量和纯度的要求；对纯度要求更高的客户推荐使用钴离子螯合磁珠。His-tagProteinPurification磁珠广泛适用于细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞等分泌或胞内表达的可溶性组氨酸标签蛋白以及变性蛋白的纯化。
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
His-Tag蛋白纯化磁珠（钴离子） IDA-Cobalt在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。

根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；

3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础说明书英文：TSC Agar Base  产品规格：250g  产品用途：用于产气荚膜梭菌的平板计数（GB标准）  
D-环丝氨酸溶液供应英文：产品规格：5ml*10  产品用途：每支添加于100ml  
梭菌强化琼脂供应英文：Reinforced Clostridium Agar  产品规格：250g  产品用途：用于梭菌的增菌培养和计数  
氯化钠胰蛋白胨稀释液说明书英文：NaCl Tryptone Broth  产品规格：250g  产品用途：用于检测亚硫酸盐还原梭菌的样品制备  
厌氧培养液供应英文：BL Agar Medium Base  产品规格：250g  产品用途：用于厌氧菌增菌培养  
产气荚膜梭菌测定用培养基价格英文：Clostridium Perfringens Assay Medium  产品规格：250g  产品用途：用于产气荚膜梭菌的分离培养  
缓冲甘油-氯化钠溶液特价英文：Buffered glycerol - Sodium Chloride Solution  产品规格：250g  产品用途：用于检测产气荚膜梭菌时样品的贮存  
乳糖亚硫酸盐培养基（LS）特价英文：Lactose Sulfite Medium(LS)  产品规格：250g  产品用途：用于产气荚膜梭菌确认试验  
哥伦比亚培养基供应英文：Columbia Medium  产品规格：250g  产品用途：用于多种微生物的增菌培养  
梭菌强化培养基说明书英文：Reinforced medium for clostridia  产品规格：250g  产品用途：用于梭菌的增菌培养和计数  
FS培养基价格英文：FS Medium  产品规格：250g  产品用途：用于梭杆菌的选择性增菌培养  
His-Tag蛋白纯化磁珠（钴离子） IDA-Cobalt牛C反应蛋白酶联免疫试剂盒
英文名称:Bovine CRP ELISA Kit
反应性:Bovine
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
检测范围:25-1600 pg/ml
灵敏度:3 pg/ml
检测目标:CRP
应用:Sandwich ELISA