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上海谷研
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DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
产品名称：BshNI (BanI) (10 U/µL)
Enzyme:BshNI(BanI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferO
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:CpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, dcmmethylation-sensitive
ThermoScientificBshNI(BanI)restrictionenzymerecognizesG^GYRCCsitesandcutsbestat37°CinObuffer(isoschizomers:AccB1I,BanI,BspT107I).SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•Southernblotting•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:BshNIcleavageisimpairedbyoverlappingdcmmethylation.Toavoiddcmmethylation,useadam-,dcm-strain,suchasGM2163.Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
BshNI (BanI) (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
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XRCC5 Monoclonal AntibodyRecombinantMouseInterleukin-23/IL-23宿主: Mouse溶解性水溶
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FABP7 Polyclonal AntibodyRecombinantMouseInterleukin-3/IL-3英文: FABP7 Polyclonal AntibodyKnownasInterleukin-3;IL-3;Hematopoieticgrowthfactor;Multipotentialcolony-stimulatingfactor;P-cell-stimulatingfactor;Il3;Il-3;Mastcellgrowthfactor;MCGF
FABP1 Monoclonal AntibodyRecombinantMouseOX40Ligand/TNFSF4/OX40宿主: MouseKnownasTumornecrosisfactorligandsuperfamilymember4;OX40ligand;OX40L;CD252;Tnfsf4
S100A4 Monoclonal AntibodyRecombinantHumanInterleukin-4ReceptorSubunitAlpha/IL-4Rα英文: S100A4 Monoclonal AntibodyKnownasInterleukin-4receptorsubunitalpha;IL-4receptorsubunitalpha;IL-4Rsubunitalpha;IL-4R-alpha;IL-4RA;CD124;IL-4-bindingprotein;IL4-BP;IL4R;IL4RA
EEF1D Polyclonal AntibodyRecombinantHumanInterleukin-35/IL-35英文: EEF1D Polyclonal AntibodyKnownasInterleukin35;IL35;hIL35
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DFFA Polyclonal AntibodyRecombinantHumanIL-23Recetor/IL-23R(Fcfusion)英文: DFFA Polyclonal AntibodyKnownasInterleukin-23receptor;IL23R;IL-23receptor;IL-23R
RRAS2 Polyclonal AntibodyRecombinantHumanFibroblastGrowthFactor4/FGF-4英文: RRAS2 Polyclonal AntibodyKnownasFibroblastgrowthfactor4;FGF-4;Heparinsecretory-transformingprotein1;HST;HST-1;HSTF-1;Heparin-bindinggrowthfactor4;HBGF-4;TransformingproteinKS3;FGF4;HST;HSTF1;KS3
PE-Cy3标记的兔抗豚鼠IgMRecombinantHumanPD-L1/B7-H1/CD274(Fcfusion)英文: Rabbit Guinea pig IgM/PE-Cy3KnownasProgrammedCellDeath1Ligand1;PD-L1;PDCD1Ligand1;ProgrammedDeathLigand1;B7Homolog1;B7-H1;CD274;B7H1;PDCD1L1;PDCD1LG1;PDL1
CGA Polyclonal AntibodyRecombinantHumanC-CMotifChemokine2/CCL2/MCP-1英文: CGA Polyclonal AntibodyKnownasC-Cmotifchemokine2;HC11;Monocytechemoattractantprotein1;Monocytechemotacticandactivatingfactor;MCAF;Monocytechemotacticprotein1;MCP-1;MonocytesecretoryproteinJE;Small-induciblecytokineA2;CCL2
CASP3 Polyclonal AntibodyRecombinantHumanInterleukin-4ReceptorSubunitAlpha/IL-4Rα(Fcfusion)英文: CASP3 Polyclonal AntibodyKnownasInterleukin-4receptorsubunitalpha;IL-4receptorsubunitalpha;IL-4Rsubunitalpha;IL-4R-alpha;IL-4RA;CD124;IL-4-bindingprotein;IL4-BP;IL4R;IL4RA
CCND1 Polyclonal AntibodyRecombinantHumanFcγRIIa/FCGR2A/CD32a英文: CCND1 Polyclonal AntibodyKnownasLowaffinityimmunoglobulingammaFcregionreceptorII-a;IgGFcreceptorII-a;CDw32;Fc-gammaRII-a;Fc-gamma-RIIa;FcRII-a;CD32;FCGR2A;FCG2;FCGR2A1;IGFR2
PIAS1 Polyclonal AntibodyRecombinantHumanIndoleamine2,3-Dioxygenase/IDO/INDO英文: PIAS1 Polyclonal AntibodyKnownasIndole2;3-dioxygenase;Indoleamine2;3-dioxygenase1;IDO-1;IDO1;IDO;INDO
BshNI (BanI) (10 U/µL)猴环加氧酶2酶联免疫试剂盒
英文名称:Monkey Cyclooxygenase 2 (COX2) ELISA Kit
反应性:Monkey
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
检测范围:46-3000 pg/ml
灵敏度:9 pg/ml
检测目标:Cyclooxygenase 2 (COX2)
应用:Sandwich ELISA
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
产品名称：BshNI (BanI) (10 U/µL)
Enzyme:BshNI(BanI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferO
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:CpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, dcmmethylation-sensitive
ThermoScientificBshNI(BanI)restrictionenzymerecognizesG^GYRCCsitesandcutsbestat37°CinObuffer(isoschizomers:AccB1I,BanI,BspT107I).SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•Southernblotting•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:BshNIcleavageisimpairedbyoverlappingdcmmethylation.Toavoiddcmmethylation,useadam-,dcm-strain,suchasGM2163.Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
BshNI (BanI) (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
以下是公司正在热销的产品：
XRCC5 Monoclonal AntibodyRecombinantMouseInterleukin-23/IL-23宿主: Mouse溶解性水溶
PRMT6 Monoclonal AntibodyRecombinantMouseTumorNecrosisFactorReceptorSuperfamilyMember5/CD40英文: PRMT6 Monoclonal AntibodyKnownasTumornecrosisfactorreceptorsuperfamilymember5;B-cellsurfaceantigenCD40;Bp50;CD40Lreceptor;CD40;TNFRSF5
FABP7 Polyclonal AntibodyRecombinantMouseInterleukin-3/IL-3英文: FABP7 Polyclonal AntibodyKnownasInterleukin-3;IL-3;Hematopoieticgrowthfactor;Multipotentialcolony-stimulatingfactor;P-cell-stimulatingfactor;Il3;Il-3;Mastcellgrowthfactor;MCGF
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S100A4 Monoclonal AntibodyRecombinantHumanInterleukin-4ReceptorSubunitAlpha/IL-4Rα英文: S100A4 Monoclonal AntibodyKnownasInterleukin-4receptorsubunitalpha;IL-4receptorsubunitalpha;IL-4Rsubunitalpha;IL-4R-alpha;IL-4RA;CD124;IL-4-bindingprotein;IL4-BP;IL4R;IL4RA
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VIM Polyclonal AntibodyRecombinantHumanFibronectin/FN宿主: RabbitKnownasNovoNectin;Fibronectin;FN;Cold-insolubleglobulin;CIG;FN;Fibronectin1
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DFFA Polyclonal AntibodyRecombinantHumanIL-23Recetor/IL-23R(Fcfusion)英文: DFFA Polyclonal AntibodyKnownasInterleukin-23receptor;IL23R;IL-23receptor;IL-23R
RRAS2 Polyclonal AntibodyRecombinantHumanFibroblastGrowthFactor4/FGF-4英文: RRAS2 Polyclonal AntibodyKnownasFibroblastgrowthfactor4;FGF-4;Heparinsecretory-transformingprotein1;HST;HST-1;HSTF-1;Heparin-bindinggrowthfactor4;HBGF-4;TransformingproteinKS3;FGF4;HST;HSTF1;KS3
PE-Cy3标记的兔抗豚鼠IgMRecombinantHumanPD-L1/B7-H1/CD274(Fcfusion)英文: Rabbit Guinea pig IgM/PE-Cy3KnownasProgrammedCellDeath1Ligand1;PD-L1;PDCD1Ligand1;ProgrammedDeathLigand1;B7Homolog1;B7-H1;CD274;B7H1;PDCD1L1;PDCD1LG1;PDL1
CGA Polyclonal AntibodyRecombinantHumanC-CMotifChemokine2/CCL2/MCP-1英文: CGA Polyclonal AntibodyKnownasC-Cmotifchemokine2;HC11;Monocytechemoattractantprotein1;Monocytechemotacticandactivatingfactor;MCAF;Monocytechemotacticprotein1;MCP-1;MonocytesecretoryproteinJE;Small-induciblecytokineA2;CCL2
CASP3 Polyclonal AntibodyRecombinantHumanInterleukin-4ReceptorSubunitAlpha/IL-4Rα(Fcfusion)英文: CASP3 Polyclonal AntibodyKnownasInterleukin-4receptorsubunitalpha;IL-4receptorsubunitalpha;IL-4Rsubunitalpha;IL-4R-alpha;IL-4RA;CD124;IL-4-bindingprotein;IL4-BP;IL4R;IL4RA
CCND1 Polyclonal AntibodyRecombinantHumanFcγRIIa/FCGR2A/CD32a英文: CCND1 Polyclonal AntibodyKnownasLowaffinityimmunoglobulingammaFcregionreceptorII-a;IgGFcreceptorII-a;CDw32;Fc-gammaRII-a;Fc-gamma-RIIa;FcRII-a;CD32;FCGR2A;FCG2;FCGR2A1;IGFR2
PIAS1 Polyclonal AntibodyRecombinantHumanIndoleamine2,3-Dioxygenase/IDO/INDO英文: PIAS1 Polyclonal AntibodyKnownasIndole2;3-dioxygenase;Indoleamine2;3-dioxygenase1;IDO-1;IDO1;IDO;INDO
BshNI (BanI) (10 U/µL)猴环加氧酶2酶联免疫试剂盒
英文名称:Monkey Cyclooxygenase 2 (COX2) ELISA Kit
反应性:Monkey
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
检测范围:46-3000 pg/ml
灵敏度:9 pg/ml
检测目标:Cyclooxygenase 2 (COX2)
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验相关实验
Cleavage Efficiency Close to the&nbs
in the DNA Extraction Kit (#K0513) followed by ethanol precipitation. DNA (0.5µg) and 10u of restriction endonuclease were incubated for 1 hour at the recommended incubation temperature and optimal buffer for each enzyme in a total volume of 40µl. Reaction
Cleavage Efficiency Close to the Termini of PCR Fragments
in the DNA Extraction Kit (#K0513) followed by ethanol precipitation. DNA (0.5µg) and 10u of restriction endonuclease were incubated for 1 hour at the recommended incubation temperature and optimal buffer for each enzyme in a total volume of 40µl. Reaction
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