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- 2025年12月23日
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上海谷研
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Enzyme:HpyF10VI(MwoI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferTango
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:CpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
ThermoScientificHpyF10VI(MwoI)restrictionenzymerecognizesGCNNNNN^NNGCsitesandcutsbestat37°CinTangobuffer.SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.Isoschizomers:BstMWI,MwoI.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•Southernblotting•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
HpyF10VI (MwoI) (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
胆汁液态培养基供应英文：Bile broth 产品规格：250g 产品用途：用于粪链球菌的胆汁耐受试验。
M-肠道菌琼脂说明书英文：M-Enterococcus Agar 产品规格：250g 产品用途：用于水中或其它物质中肠球菌分离培养和计数（滤膜法或划线法）
粪肠球菌琼脂说明书英文：Enterococcus faecalis Agar 产品规格：250g 产品用途：用于粪肠球菌的选择性分离
THB培养基供应英文：THB Medium 产品规格：250g 产品用途：用于链球菌增菌培养
PS琼脂说明书英文：PS Agar 产品规格：250g 产品用途：用于消化球菌的培养
肠球菌肉汤供应英文：Enterococcus Broth 产品规格：250g 产品用途：用于肠球菌增菌培养
脑心浸液肉汤说明书英文：Brain Heart Infusion Broth 产品规格：250 产品用途：营养丰富,用于培养各种细菌
多粘菌素B供应英文：产品规格：1.5mg/支*5 产品用途：每支添加于100mlHB8297-1中，用于猪链球菌的增菌培养
脑-心浸萃液态培养基供应英文：Brain Heart Infusion Broth 产品规格：250g 产品用途：用于营养苛求细菌的增菌培养
脑心浸液琼脂（BHIA）说明书英文：Brain Heart infusion Agar 产品规格：250g 产品用途：用于营养苛求细菌的增菌培养
Pfizer肠球菌选择性琼脂（PSE琼脂）说明书英文：Pfizer Enterococcus Selective Agar 产品规格：250g 产品用途：用于粪链球菌的选择性分离（SN标准）
HpyF10VI (MwoI) (10 U/µL)人Dickkopf相关蛋白3elisa检测试剂盒
英文名称:Human Dkk-3 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:15 pg/ml
检测目标:Dkk-3
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验人VI型胶原蛋白(Collagen VI)ELISA试剂盒 说明书
为横坐标， OD 值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。 3. 根据样品 OD 值在该曲线图上查出相应 Collagen VI 含量。 试剂盒性能 1. 灵敏度 ： 最小的Collagen VI 检测浓度小于 10n g/ml。 2. 特异性： 可同时检测重组或天然的人 Collagen VI 。 不与 人其它细胞因子有交叉反应。 3. 重复性：板内、板见变异系数均小于10％。 注意事项
(1992) The oligonucleotides we use are kits, contaning 20 decamers, from Operon Technologies Inc. . I. DNase I treatment of RNA mix and incubate for 30 min. at 37 °C : 50 µgRNA, 10 µl RNase inhibitor (1 U/µl), 1 µl
Construction and Characterization of Adenovirus Vectors
2006 ). Suspend the DNA in a total volume of 25 µL of 0.1X TE-Ad. 12. Repeat Steps 5-10 with 5 µL of DNA (from Step 11) and 100 µL of DH5 cells, rather than BJ5183. 13. Select two colonies from each plate. Purify the DNA
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