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- 2025年12月22日
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上海谷研
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作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
Mph1103I (NsiI) (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
产品名称：Mph1103I (NsiI) (10 U/µL)
Enzyme:Mph1103I(NsiI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferR
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:NotCpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
ThermoScientificMph1103I(NsiI)restrictionenzymerecognizesATGCA^Tsitesandcutsbestat37°CinRbuffer(Isoschizomers:EcoT22I,NsiI,Zsp2I).SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•SouthernBlot•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
HB6260
伊红亚甲蓝乳糖蔗糖琼脂 incubation media 伊红亚甲蓝乳糖蔗糖琼脂
LB肉汤 250g 用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和增菌。
SD大鼠骨髓间质干细胞成软骨诱导分化完全培养基SDratbonemarrowmesenchymalstemcellsintochondrocytesinduceddifferentiationofcompletemedium
FB1(Half-Fraser)添加剂(A、B) 2ml*40 每套添加于225mlHB4190中
VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人细胞裂解液 (阳性对照)
草鱼肝脏细胞;L8824
Spike Others MERS-CoV 中东呼吸综合征冠状病毒 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein (ECD 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
恒河猴肾细胞;RM-2 人骨髓样甲状腺癌细胞，TT细胞 TE-10(食管癌细胞)
人慢性髓系白血病细胞;K562
原代单核细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml
Nafcillin sodium salt monohydrate 7177-50-6 质量规格：HPLC>98%,标准品
Atosiban Acetate 90779-69-4 质量规格：>98%,BR
Trelagliptin free base 865759-25-7 质量规格：>98%,BR
Cefotaxime Sodium 64485-93-4 质量规格：Purity>97%,Potency920ug/mg,USP
Cefotaxime Sodium 64485-93-4 质量规格：效价测定
VX-11e 896720-20-0 质量规格：>98%,BR
Alogliptin(SYR-322) 850649-61-5 质量规格：>98%,BR
Curcumenol 19431-84-6 质量规格：HPLC≥98%,标准品
BYL-719 1217486-61-7 质量规格：>98%,选择性的PI3Kα抑制剂
BYL-719 1217486-61-7 质量规格：>98%,选择性的PI3Kα抑制剂
A66 1166227-08-2 质量规格：>98%,BR
SC514 354812-17-2 质量规格：>98%,BR
γ-Cyclodextrin 17465-86-0 质量规格：>98%,BR
Me-β-CD 128446-36-6 质量规格：>98%,BR
Epothilone B(EPO906, Patupilone) 152044-54-7 质量规格：>98%,BR
Mph1103I (NsiI) (10 U/µL)人髓系细胞触发受体2elisa检测试剂盒
英文名称:Human TREM2 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:23 pg/ml
检测目标:TREM2
应用:Sandwich ELISA
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
Mph1103I (NsiI) (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
产品名称：Mph1103I (NsiI) (10 U/µL)
Enzyme:Mph1103I(NsiI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferR
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:NotCpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
ThermoScientificMph1103I(NsiI)restrictionenzymerecognizesATGCA^Tsitesandcutsbestat37°CinRbuffer(Isoschizomers:EcoT22I,NsiI,Zsp2I).SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•SouthernBlot•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
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VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人细胞裂解液 (阳性对照)
草鱼肝脏细胞;L8824
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人慢性髓系白血病细胞;K562
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Nafcillin sodium salt monohydrate 7177-50-6 质量规格：HPLC>98%,标准品
Atosiban Acetate 90779-69-4 质量规格：>98%,BR
Trelagliptin free base 865759-25-7 质量规格：>98%,BR
Cefotaxime Sodium 64485-93-4 质量规格：Purity>97%,Potency920ug/mg,USP
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A66 1166227-08-2 质量规格：>98%,BR
SC514 354812-17-2 质量规格：>98%,BR
γ-Cyclodextrin 17465-86-0 质量规格：>98%,BR
Me-β-CD 128446-36-6 质量规格：>98%,BR
Epothilone B(EPO906, Patupilone) 152044-54-7 质量规格：>98%,BR
Mph1103I (NsiI) (10 U/µL)人髓系细胞触发受体2elisa检测试剂盒
英文名称:Human TREM2 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:23 pg/ml
检测目标:TREM2
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验相关实验
0.25mL，混匀后，置室温2h。 (6) 在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵，置4℃1h。 (7) 3000rpm离心0.5h，弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次，最后沉淀物溶于少量0.15MpH7.4的PBS中。 (8) 将上述溶液装入透析袋中，对0.15MpH7.4的PB缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏试剂检测)，10,000rpm离心30min去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。 4. 结果判定： (1)
8qoqdCv3RN/yazDp0Qt8JHmJhY+U5M19ZzQCif3ZkNE48HqYABNIEwRk8BfnGVlyIYtyCHy/u+K9qwf8QqJNTlUbBfTzI49WKn6EBbjD+TvNy7AGikbS0ESbKb9kAkwgBgKs+YgBCl9iAkwgtQjQsYsQPoI/YNfA6jh9xz10InnqYpzFGgyvkhOSuKFVCXNOV1LoJH89sMKSOecgPjRlgb/gcv8crv6sjvE7B8IkJrMThc6OB2MC6YsACx/pa794
A/CCGGT NgoMIV G/CCGGC AhdI GA***N/NNGTC NheI G/CTAGC ApaI GGGCC/C NotI GC/GGCCGC ApaLI G/TGCAC NruI TCG/CGA AscI GG/CGCGCC NsiI ATGCA/T AseI AT/TAAT OliI CA***/NNGTG AsiSI GCGAT/CGC PacI TTAAT/TAA AvrII C/CTAGG PciI A/CATGT BaeI A***NNGTAYC,12
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