总蛋白检测试剂盒(双缩脲比吸光度比色法)

生化检测试剂盒的反应原理

物质浓度。 两点终点法常应用于双试剂的测定项目中，多数第一试剂通常只含缓冲液等成分，它与样本一般不起特异性反应;因此在第二试剂加入前，选择一个测光点作为第一读数点，此时的吸光度相当于样品空白。加入第二试剂后待测物质起反应，并经过一定时间反应到达平衡点，此时选择第二个读数点，两读数点吸光度之差用于计算待测物质浓度。 两点法能有效消除样品溶血、黄疸、脂浊等造成的光吸收干扰。如：酶法测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐，以及化学法测定总蛋白、总胆红素、直接胆红素、钙、磷、镁、铁等;并且都能在加入

血清总蛋白质的测定方法

1、凯氏定氮法仍然是建立各个具体方法时采用的参考标准方法。2、双缩脲比色法是目前首先推荐的蛋白质定量方法。方法操作简便，虽然双缩脲试剂有大同不异。其中酒石酸钾纳可以稳定在碱性溶液中的铜离子，含有碘化物作为抗氧化剂。双缩脲反应生成的复合物其吸收峰为540nm。可采用公认的标准牛血清白蛋白作为标准品，经精确称量，必要时用凯氏定氮法标定。各地质控中心提供的混合标准血清可作为第二参考，血清用量100μl，在10-120g/L浓度范围内呈良好线性关系，批内CV值3、基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使

如何提取总蛋白？

大家目前最常用的方法是利用溶液法进行蛋白提取（如 RIPA 裂解液），但是往往会在蛋白质提取中产生两个不同的组分，即 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分。通常 RIPA 不可溶性组分被我们直接丢弃忽略。但是已经有文章证实许多蛋白质存在于被丢弃的 RIPA 不可溶性组分中。也就是说利用溶液法提取的并非是完整的总蛋白，而仅仅是一些可溶性蛋白。溶液法进行提取蛋白时会人工激活 caspase-3 和 caspase-7；还会人工激活某些激酶活性；影响磷酸化研究；影响细胞外基质；影响定量，定性