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上海谷研
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作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
SacI (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
产品名称：SacI (10 U/µL)
Enzyme:SacI
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:UniqueBuffer(10xBufferSacI)
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:NotCpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
ThermoScientificSacIrestrictionenzymerecognizesGAGCT^Csitesandcutsbestat37°Cinitsownuniquebuffer.SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.Isoschizomers:Eco53kI,EcoICRI,Psp124BI,SstI.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•Southernblotting•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:SacIissensitivetocytosinemethylationatGAGmCTC,butnotGAGCTmCandinsensitivetoadeninemethylationatGmAGCTC.AluImethyltransferase(AGmCT)canbeusedtoblockSacI.Supercoiledplasmidsmayrequireupto5-foldmoreSacIforcompletedigestionthanlinearDNA.SacIisinhibitedbycommonclinicalanticoagulantsfoundinsomepreparationofanticoagulatedperipheralbloodandbonemarrow.LevelsofEDTAandACD(citricacid-sodiumcitrate-dextrose)instandardsamplepreparationhavebeenshowntoinhibitSacI.?ThreetimesthenormalconcentrationforheparinisrequiredtoinhibitSacI.(J.E.Coadetal.,Inhibitionofrestrictionendonucleasesbycommonclinicalanticoagulants.Anal.Biochem.?205,368-369,1992).Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
ARRB1 Monoclonal Antibody鸭骨髓单核细胞分离液试剂盒宿主: Mouse储存条件 2-8℃
CDK1 Monoclonal Antibody狗骨髓单核细胞分离液试剂盒宿主: Mouse储存条件 2-8℃
XRCC1 Monoclonal Antibody羊骨髓单核细胞分离液试剂盒英文: XRCC1 Monoclonal Antibody储存条件 2-8℃
ETS2 Polyclonal Antibody兔骨髓单核细胞分离液试剂盒英文: ETS2 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
EXTL3 Polyclonal Antibody豚鼠脾脏中性粒细胞分离液试剂盒英文: EXTL3 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
PBOV1 Polyclonal Antibody鸡脾脏中性粒细胞分离液试剂盒英文: PBOV1 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
CALU Polyclonal Antibody牛脾脏白细胞分离液试剂盒英文: CALU Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
REG3A Polyclonal Antibody猫脾脏白细胞分离液试剂盒英文: REG3A Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
SELE Polyclonal Antibody猪骨髓白细胞分离液试剂盒英文: SELE Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
HDAC2 Polyclonal Antibody猴肿瘤浸润组织白细胞分离液试剂盒英文: HDAC2 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
SELPLG Polyclonal Antibody马外周血血小板分离液试剂盒宿主: Rabbit储存条件 2-8℃
BTK Polyclonal Antibody猴外周血血小板分离液试剂盒英文: BTK Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
CDC25C Polyclonal Antibody大鼠脾脏中性粒细胞分离液试剂盒英文: CDC25C Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
MMP8 Polyclonal Antibody牛脾脏中性粒细胞分离液试剂盒英文: MMP8 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
IRF3 Polyclonal Antibody猫脏器组织中性粒细胞分离液试剂盒英文: IRF3 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
TOLLIP Polyclonal Antibody羊脾脏白细胞分离液试剂盒英文: TOLLIP Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
SacI (10 U/µL)兔基质金属蛋白酶8酶联免疫试剂盒
英文名称:Rabbit MMP-8 ELISA Kit
反应性:Rabbit
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
检测范围:93-6000 pg/ml
灵敏度:18 pg/ml
检测目标:MMP-8
应用:Sandwich ELISA
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
SacI (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
产品名称：SacI (10 U/µL)
Enzyme:SacI
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:UniqueBuffer(10xBufferSacI)
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:NotCpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
ThermoScientificSacIrestrictionenzymerecognizesGAGCT^Csitesandcutsbestat37°Cinitsownuniquebuffer.SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.Isoschizomers:Eco53kI,EcoICRI,Psp124BI,SstI.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•Southernblotting•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:SacIissensitivetocytosinemethylationatGAGmCTC,butnotGAGCTmCandinsensitivetoadeninemethylationatGmAGCTC.AluImethyltransferase(AGmCT)canbeusedtoblockSacI.Supercoiledplasmidsmayrequireupto5-foldmoreSacIforcompletedigestionthanlinearDNA.SacIisinhibitedbycommonclinicalanticoagulantsfoundinsomepreparationofanticoagulatedperipheralbloodandbonemarrow.LevelsofEDTAandACD(citricacid-sodiumcitrate-dextrose)instandardsamplepreparationhavebeenshowntoinhibitSacI.?ThreetimesthenormalconcentrationforheparinisrequiredtoinhibitSacI.(J.E.Coadetal.,Inhibitionofrestrictionendonucleasesbycommonclinicalanticoagulants.Anal.Biochem.?205,368-369,1992).Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
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BTK Polyclonal Antibody猴外周血血小板分离液试剂盒英文: BTK Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
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MMP8 Polyclonal Antibody牛脾脏中性粒细胞分离液试剂盒英文: MMP8 Polyclonal Antibody储存条件 2-8℃
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反应性:Rabbit
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
检测范围:93-6000 pg/ml
灵敏度:18 pg/ml
检测目标:MMP-8
应用:Sandwich ELISA
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