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- 2025年10月24日
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深圳子科生物
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250ml
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文献和实验-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次（对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤）。 加入预冷的 RIPA 液（含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂），RIPA 液的用量：按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注：悬浮细胞，收集
水研磨成匀浆，转移到 离心管 中，再用6mL 蒸馏水分次洗涤研钵，洗涤液收集于同一 离心管 中，放置0.5~1h 以充分提取，然后在4 000r/min 离心20min，弃去沉淀，上清液转入10mL 容量瓶，并以蒸馏水定容至刻度，即得待测样品提取液。 （2）测定：另取2 支10mL 具塞 试管 ，按下表取样。吸取提取液0.1mL（做一重复），放入具塞刻度 试管 中，加入5mL 考马斯亮蓝G-250 蛋白
----------------------------------------------【四】 考马斯亮蓝快速染色和脱色（极其好用！！！！！）考马斯亮蓝染色液 1000 mL：先称取考马斯亮蓝R250 1.0 g 于1000 mL试剂瓶内，加入甲醇450mL溶解，再加冰醋酸100 mL和双蒸水450 mL至大约1000 mL。室温可放置12个月以上。染色液可倒入专用的回收试剂瓶，届时加入适量甲醇、考马斯亮蓝和大约10 g/L的三氯乙酸后可重复使用。考马斯亮蓝脱色液 10 L：于10 L洁净塑料
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