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- 2025年08月25日
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深圳子科生物
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100ml
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文献和实验被有效裂解。解决方法：可用经典碱裂解法抽提质粒 DNA 方法中的 II 液替代 Solution II 使用。 3.出现严重的 RNA 污染？ （1）未在 Solution I 中事先加入 RNase A1。解决方法：补加 RNase A1。 （2）加入 RNase A 1的 Solution I 长期保存于室温，导致 RNase A1 活性下降。 （3）细菌过量, RNase A1 不能有效降解 RNA。解决方法：将细菌用量减半或增加 RNase A1 在 Solution I 中
NaCl，然后缓慢加入 10 g CTAB (十六烷基三甲基溴化铵)，同时加热并搅拌，可加热至 65℃ 溶解，定容终体积至 100 mL。3. CTAB 沉淀液： 1% (w/v) CTAB，50 mM Tris.Cl (pH8.0)，10 mM EDTA(pH8.0)4. 高盐 TE 缓冲液: 10 mM Tris.Cl (pH8.0)，0.1 mM EDTA (pH8.0)，1M NaCl【实验方法与步骤】1. 在所需量的 CTAB 抽提液中加入 2-巯基乙醇，使终浓度达 2% (v/v
液。(2 )2×SDS -PAGE 凝胶电泳加样缓冲液：100 mmol / L Tris-HCI (pH 8 .0 )100 mmol / L DTT4 %SDS0.2 % 溴酚蓝20 % 甘油三、实验方案1、外源基因的诱导表达(1 ）用适当的限制性内切核酸酶消化载体DNA 和目的基因。(2 ）按连接步骤连接目的基因和载体，并转化到相应的宿主菌。(3 ）筛选出含重组子的转化菌落，提取质粒DNA 作限制性内切核酸酶图谱，DNA 序列测定，确定无误后进行下一步。(4 ）如果表达载体的原核启动子为PL 启动
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