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26
- 英文名:
SSC,20×(pH5.3)
- 保质期:
有效期18个月
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
RT
- 规格:
瓶
⒈溶液I—溶菌液:
溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II-NaOH-SDS液:
NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。
但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。
20×SSC pH5.3在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:
(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
(2)解聚细胞中的核蛋白。
(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理,可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一,盐析即在高浓度Nacl溶液中,蛋白质析出的现象。原理如下
(1)Nacl溶液与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;
(2)Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出;
2.不同浓度下DNA分子构象(三维结构)不同,不同的构象溶解度也不同。
(1)当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小,因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出;
(2)DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高;
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液,使得蛋白质析出,而DNA溶解度较大,通过高速离心,取上清并去除沉淀,进而去除蛋白质。
产品名称:20×SSC pH5.3
别名:20×SSC溶液
英文名称:SSC,20×(pH5.3)
储存条件:RT,有效期18个月
单位:瓶
用于 Southern blot DNA电泳产品说明:组分浓度NaCl3M柠檬酸钠0.3MHCl调节pH值至5.3SSC(salinesodiumcitrate)缓冲溶液是分子生物学中最标准的印迹和杂交处理溶液,旨在用于各种杂交实验达到变性和清洗的目的,主要成分为氯化钠和柠檬酸钠。SSC缓冲液中柠檬酸钠起缓冲作用,盐离子(Na)中和核酸主链上的负电荷,使其呈电中性,这样可以使探针和靶序列的结合比较容易进行。也用于SDS-PAGE电泳分离胶配制。用于核酸杂交,不同浓度作用不同:常用2×,及0.5×2×SSC:高盐洗膜,洗去部分非特异性结合的探针。0.5×SSC:低盐洗膜,增加核酸链的严紧性,使得RNA/DNA之间的排斥力增加。本产品为20×浓缩液,可根据实验要求使用去离子水直接稀释使用。注意事项:1.使用过程中要注意避免溶液被微生物污染。2.室温条件下保存,如果低温保存溶液,可能会产生沉淀,可摇晃或加热溶解。
DNA沉淀剂:
原则:不与DNA反应,对其无影响。
1.纯乙醇(二倍体积比);效率高,需要放置的时间短,在公司用Kit提取的时候,没有放置直接进行下一步;确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇,价格相对于纯乙醇便宜,但是会损失DNA;
3.异丙醇(0.6倍体积);
(1)普通细胞上清液体,静止15-30min即可沉淀;
(2)对于含量低,或者组织(比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA),则最好在-20℃放置2h或者以上,
本人提取肝脏组织DNA时候,最长时间放置了三天,对结果并无影响;上周提取细胞中cccDNA的时候,室温放置了15min,结果提出的DNA含量也挺高的,而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高,所以时间短点也可以,但是如果时间不是很着急,还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品:
PSMA1 Polyclonal Antibody资源名称:大鼠甲状腺细胞英文: PSMA1 Polyclonal Antibody 种属 :FRTL-5
NFATC1 Polyclonal Antibody资源名称:弥漫大B细胞淋巴瘤细胞英文: NFATC1 Polyclonal Antibody 种属 :0cily10
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CLDN5 Polyclonal Antibody资源名称:小鼠食管癌细胞英文: CLDN5 Polyclonal Antibody 种属 :AKR
MB Polyclonal Antibody资源名称:人骨肉瘤细胞英文: MB Polyclonal Antibody 种属 :U2OSE6Tet6
CEACAM3 Polyclonal Antibody资源名称:人源胰腺癌细胞英文: CEACAM3 Polyclonal Antibody 种属 :PAXC-010
20×SSC pH5.3人丝氨酸肽酶抑制因子Kunitz型2elisa检测试剂盒
英文名称:Human SPINT2 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:30 pg/ml
检测目标:SPINT2
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验20×SSC溶液 【配制方法】 在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/l NaOH溶液调节 pH值至7.0,加水定容至1L,分装后高压灭菌。 (责任编辑:大汉昆仑王)
样品:重组胰蛋白酶,比活 4500USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适 pH 的研究 准备 pH 为 3~12 的底物 BAEE(0.25 mM),分别测定 rPT 纯酶液的活性,最后结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。缓冲液成分依次为 25 mM NaAc-HAc (pH 3~6),25 mM Tris-HCl (pH 7~8),25
酸度计简称pH计,由电极和电计两部分组成。使用中若能够合理维护电极、按要求配制标准缓冲液和正确操作电计,可大大减小pH示值误差,从而提高化学实验、医学检验数据的可靠性。 一、正确使用与保养电极 目前实验室使用的电极都是复合电极,其优点是使用方便,不受氧化性或还原性物质的影响,且平衡速度较快。使用时,将电极加液口上所套的橡胶套和下端的橡皮套全取下,以保持电极内氯化钾溶液的液压差。下面就把电极的使用与维护简单作一介绍: ⒈复合电极不用时,可充分浸泡3M氯化钾溶液中。切忌用洗涤液或其他吸水
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