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SYBR Green I(10000×)

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  • 上海谷研
  • GOY-C6455
  • 进口、国产
  • 2025年12月14日
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    • 英文名

      SYBRGreenI(10000×)

    • 保质期

      有效期1年

    • 供应商

      上海谷研

    • 保存条件

      -20℃,避光

    • 规格

       支

    产品名称:SYBR Green I(10000×)
    别名:SYBRGreenI(10000×)

    英文名称:SYBRGreenI(10000×)
    储存条件:-20℃,避光,有效期1年
    单位:支
    规格:50/100ul保存:-20℃避光保存,有效期12个月。产品简介:采用琼脂糖电泳检测双链DNA时,SYBRGreenⅠ是最灵敏的荧光染料,当其结合到核酸上时,会产生很强的荧光及高量子产额,DNA/SYBRGreenⅠ复合物的量子产额均为0.8。由于与核酸结合后能产生很强的信号,背景极低,并且对核酸的亲和力高,因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。SYBRGreenⅠ的最低检出限:20pgDNA(254nm);60pgDNA(300nm紫外透射);此外,SYBRGreenⅠ还可以用于检测寡核苷酸(1-2ng,300nm紫外透射),比EB灵敏20至100倍。SYBRGreenⅠ用于电泳检测DNA时,既可预染,也可电泳后再进行染色。SYBRGreenⅠ用于琼脂糖电泳检测DNA后,可直接将DNA转移至膜上,进行后续核酸印迹杂交反应。此外,SYBRGreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用,可直接进行消化或连接。使用说明:该产品使用方法同EB. 点染法:用于琼脂糖凝胶电泳:取原液1ul加入TE缓冲液或灭菌双蒸水1ml,再加入6×DNALoadingbuffer上样缓冲液1ml混匀,(此时溶液为1:2000稀释,即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后静置5min后直接上样。 胶染法:常规配置琼脂糖凝胶100ml,加热至融化,待温度将至50-70℃(感觉不烫手)加入该原液10ul。待胶凝固后即可电泳,电泳结束后即可在紫外照射下观察。注意事项:1.SYBRGreenⅠ应避光存放,原液保存于-20℃;建议分装冻存,短期可以4℃保存。2.胶染法灵敏度较高,须将商品化的DNAmarker稀释5-10倍后使用。3.在预染色方法中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBRGreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。4.在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBRGreenI可以全部从双链核酸上去掉。5.在紫外照射透视下,与双链 DNA接合的 SYBRGreenI呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA则颜色为橘黄而不是绿色。6.SYBRGreen对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
    作用及原理:
    ⒈溶液I—溶菌液:
    溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。
    葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。
    EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
    ⒉溶液II-NaOH-SDS液:
    NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。
    但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。
    SYBR Green I(10000×)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
    SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:
    1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
    2)解聚细胞中的核蛋白。
    3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。

    产品细节图片1
    根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理,可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
    1.Nacl是常用的盐析材料之一,盐析即在高浓度Nacl溶液中,蛋白质析出的现象。原理如下
    1)Nacl溶液与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;
    2)Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出;
    2.不同浓度下DNA分子构象(三维结构)不同,不同的构象溶解度也不同。
    1)当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小,因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出;
    2)DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高;

    产品细节图片2
    3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液,使得蛋白质析出,而DNA溶解度较大,通过高速离心,取上清并去除沉淀,进而去除蛋白质。
    DNA沉淀剂:
    原则:不与DNA反应,对其无影响。
    1.纯乙醇(二倍体积比);效率高,需要放置的时间短,在公司用Kit提取的时候,没有放置直接进行下一步;确定是价格相对昂贵。
    2.95%乙醇,价格相对于纯乙醇便宜,但是会损失DNA;
    3.异丙醇(0.6倍体积);
    1)普通细胞上清液体,静止15-30min即可沉淀;
    2)对于含量低,或者组织(比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA),则最好在-20℃放置2h或者以上,
    本人提取肝脏组织DNA时候,最长时间放置了三天,对结果并无影响;上周提取细胞中cccDNA的时候,室温放置了15min,结果提出的DNA含量也挺高的,而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高,所以时间短点也可以,但是如果时间不是很着急,还是按照规定的时间来做比较保险。
    以下是公司正在热销的产品:
    CD55 Polyclonal Antibody 种属 :Streptosporangium amethystogenes subsp. fukuiense│sp.英文: CD55 Polyclonal Antibody 模式菌株:no

    USP26 Polyclonal Antibody 种属 :Nocardioides│perillae英文: USP26 Polyclonal Antibody 模式菌株:yes
    PPIF Polyclonal Antibody 种属 :Streptomyces│spectabilis英文: PPIF Polyclonal Antibody 模式菌株:no
    OPCML Polyclonal Antibody 种属 :Streptomyces│tsukubaensis英文: OPCML Polyclonal Antibody应用领域:产生他克莫司(tacrolimus)
    GPT Polyclonal Antibody 种属 :Cylindrocarpon│sp.英文: GPT Polyclonal Antibody 模式菌株:no
    PCDH1 Polyclonal Antibody 种属 :Streptomyces│tsukubaensis英文: PCDH1 Polyclonal Antibody应用领域:产生免疫抑制剂FK506
    CD53 Polyclonal Antibody 种属 :Scopulariopsis│sp.英文: CD53 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
    Bax Polyclonal Antibody 种属 :Streptomyces│intermedius英文: Bax Polyclonal Antibody培养方法
    AARS Polyclonal Antibody 种属 :Streptomyces│turgidiscabies英文: AARS Polyclonal Antibody培养方法
    TLR7 Polyclonal Antibody 种属 :Actinoplanes│digitatis英文: TLR7 Polyclonal Antibody应用领域: 模式菌株:
    RAP1A Polyclonal Antibody 种属 :Acremonium│sp.英文: RAP1A Polyclonal Antibody 模式菌株:no
    ECE2 Polyclonal Antibody 种属 :Eupenicillium│sp.英文: ECE2 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
    ORAI1(L1) Polyclonal Antibody 种属 :Actinomadura│ochracea英文: ORAI1(L1) Polyclonal Antibody培养方法
    BPI Polyclonal Antibody 种属 :Streptomyces│plicatus英文: BPI Polyclonal Antibody应用领域:产生放线D
    SH3GL2 Polyclonal Antibody 种属 :Streptomyces│aculeolatus英文: SH3GL2 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
    ALOX15B Polyclonal Antibody 种属 :Gliomastix│sp.英文: ALOX15B Polyclonal Antibody 模式菌株:no
    SYBR Green I(10000×)人白细胞介素22elisa检测试剂盒

    英文名称:Human IL-22 ELISA KIT
    反应性:Human
    样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
    灵敏度:15 pg/ml
    检测目标:IL-22
    应用:Sandwich ELISA 
     

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