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- 2025年12月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 英文名：
PfuDNAPolymerase
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
上海谷研
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
支
使用方法：
一：用新鲜组织样品
1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积（1g组织需10mL）。
2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5. 将收集管存放于温度适当的地方，存放时间不能超过该温度下的zui长存放时间，如果要存放在-20℃或-80℃，需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到zui后的温度。注：将样品转移到-20℃或-80℃前，需要倒弃保护液。常见存放温度与其zui长存放时间关系为如下：
6. 从存放处取出样品 (-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化)，用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
7. 立即开始RNA 提取或进行其他处理 (如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。
产品名称：Pfu DNA Polymerase
别名:PfuDNA聚合酶
英文名称:PfuDNAPolymerase
储存条件:-20℃，有效期1年
外观（性状）:液体
单位:支
本公司生产的PfuDNAPloymerase是从克隆有PyrococcusfuriosisDNAPloymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白，其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错配，而传统的Taq酶却不能，其它耐热DNAPolymerase如Vent、DeepVent、Tli、UITma等虽具有校正功能，但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNAPolymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性，PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟，比Taq酶要低。Pfu酶比Taq酶热稳定性更好，95℃1小时仍保持90%以上的活性，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端，可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。Pfu来源：表达PfuDNA聚合酶的大肠杆菌。 Pfu酶储存缓冲液：50mMTris-HCl，pH8.2；0.1mMEDTA；1mMDTT；0.1%NonidetP40；0.1%Tween20；50%甘油。 Pfu单位定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmmoldNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需要的酶量为一个单位。 Pfu用途：1）常规PCR反应中的DNA高保真体外扩增； 2）基因定点突变和拼接。 Pfu注意事项： 1、 酶浓度：建议在50ml的体系中使用1.25个单位的PfuDNA聚合酶，因为酶存在3’-5’外切酶活性，高浓度的酶可能会增加降解引物的可能性。最好在加完dNTP后再添加PfuDNA聚合酶。并在有冰浴的条件下混合PCR反应中的各种成分。 2、延伸时间：PfuDNA聚合酶的延伸速率低于TaqDNA聚合酶，大约为一分钟600个碱基（TaqDNA聚合酶大约为一分钟2000个碱基），因此建议扩增1Kb的DNA用两分钟的延伸时间。对于大多数的反应而言，25～35个扩增循环就足够了。 Pfu保存：-20℃保存至少一年。
注意事项：
● 溶液PE 第一次使用前请按瓶上标签加入4 倍体积的无水乙醇，即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 无水乙醇，20 ml 溶液PE 中加入80 ml 无水乙醇，使用后立即盖紧盖子。
● 本产品对电泳使用的Agarose 种类没有严格限制，可以使用普通Agarose 。为了保证回收DNA 的质量和DNA 回收效率，希望使用高纯度的Agarose ，但没有必要一定要使用低熔点的Agarose 等。
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液，以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间，在条带分离清晰后进行切胶回收，以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率，切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小，或DNA 初始量少，回收率将会偏低。
● 溶液Eluent（10 mM Tris-HCl, pH 8.5）中不含EDTA，其收集的DNA 片段可直接用于各种酶促反应等，不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率，请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的片段。
● 请严格按照操作步骤操作。
操作流程：
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
以下是Pfu DNA Polymerase的相关产品：
CLDN11 Polyclonal Antibody 种属 Streptococcus│sp.英文: CLDN11 Polyclonal Antibody应用领域B X
DEFA1 Polyclonal Antibody 种属 Enterobacter│sakazakii英文: DEFA1 Polyclonal Antibody培养方法
RAB23 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│madelia英文: RAB23 Polyclonal Antibody应用领域(1),6,14,25 y 1,7
STAU2 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│reading英文: STAU2 Polyclonal Antibody应用领域4,12 e,h 1,5
CD99 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│oranienburg英文: CD99 Polyclonal Antibody应用领域6,7 m,t -
RPL17 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│sendai英文: RPL17 Polyclonal Antibody应用领域1,9,12 a 1,5
SLC3A2 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│bukavu英文: SLC3A2 Polyclonal Antibody应用领域1,40 l,z28 1,5
CD1D Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│aesch英文: CD1D Polyclonal Antibody应用领域6,8 z60 1,2
ALDH7A1 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│minnesota英文: ALDH7A1 Polyclonal Antibody应用领域21 - -,z33
CHCHD3 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│typhi 27V Reitman strain stre英文: CHCHD3 Polyclonal Antibody应用领域弱毒株,口服菌苗侯选株 9,12,Vi d -
ADH7 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│blegdam英文: ADH7 Polyclonal Antibody应用领域9,12 g,m,q -
SRM Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│niloese英文: SRM Polyclonal Antibody应用领域1,3,19 d z6
ACSL6 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│lexington英文: ACSL6 Polyclonal Antibody应用领域3,10,26 z10 1,5
CCR8 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│milwaukee英文: CCR8 Polyclonal Antibody应用领域43 fg -
PPP3CA Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│rutgers英文: PPP3CA Polyclonal Antibody应用领域3,10 l, z40 1,7
EEF1G Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│greenside英文: EEF1G Polyclonal Antibody应用领域50 z e,n,x
Pfu DNA Polymerase人粒细胞集落刺激因子elisa检测试剂盒
英文名称:Human G-CSF ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:8 pg/ml
检测目标:G-CSF
应用:Sandwich ELISA
一：用新鲜组织样品
1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积（1g组织需10mL）。
2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5. 将收集管存放于温度适当的地方，存放时间不能超过该温度下的zui长存放时间，如果要存放在-20℃或-80℃，需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到zui后的温度。注：将样品转移到-20℃或-80℃前，需要倒弃保护液。常见存放温度与其zui长存放时间关系为如下：
6. 从存放处取出样品 (-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化)，用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
7. 立即开始RNA 提取或进行其他处理 (如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。
产品名称：Pfu DNA Polymerase
别名:PfuDNA聚合酶
英文名称:PfuDNAPolymerase
储存条件:-20℃，有效期1年
外观（性状）:液体
单位:支
本公司生产的PfuDNAPloymerase是从克隆有PyrococcusfuriosisDNAPloymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白，其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错配，而传统的Taq酶却不能，其它耐热DNAPolymerase如Vent、DeepVent、Tli、UITma等虽具有校正功能，但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNAPolymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性，PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟，比Taq酶要低。Pfu酶比Taq酶热稳定性更好，95℃1小时仍保持90%以上的活性，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端，可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。Pfu来源：表达PfuDNA聚合酶的大肠杆菌。 Pfu酶储存缓冲液：50mMTris-HCl，pH8.2；0.1mMEDTA；1mMDTT；0.1%NonidetP40；0.1%Tween20；50%甘油。 Pfu单位定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmmoldNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需要的酶量为一个单位。 Pfu用途：1）常规PCR反应中的DNA高保真体外扩增； 2）基因定点突变和拼接。 Pfu注意事项： 1、 酶浓度：建议在50ml的体系中使用1.25个单位的PfuDNA聚合酶，因为酶存在3’-5’外切酶活性，高浓度的酶可能会增加降解引物的可能性。最好在加完dNTP后再添加PfuDNA聚合酶。并在有冰浴的条件下混合PCR反应中的各种成分。 2、延伸时间：PfuDNA聚合酶的延伸速率低于TaqDNA聚合酶，大约为一分钟600个碱基（TaqDNA聚合酶大约为一分钟2000个碱基），因此建议扩增1Kb的DNA用两分钟的延伸时间。对于大多数的反应而言，25～35个扩增循环就足够了。 Pfu保存：-20℃保存至少一年。
注意事项：
● 溶液PE 第一次使用前请按瓶上标签加入4 倍体积的无水乙醇，即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 无水乙醇，20 ml 溶液PE 中加入80 ml 无水乙醇，使用后立即盖紧盖子。
● 本产品对电泳使用的Agarose 种类没有严格限制，可以使用普通Agarose 。为了保证回收DNA 的质量和DNA 回收效率，希望使用高纯度的Agarose ，但没有必要一定要使用低熔点的Agarose 等。
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液，以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间，在条带分离清晰后进行切胶回收，以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率，切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小，或DNA 初始量少，回收率将会偏低。
● 溶液Eluent（10 mM Tris-HCl, pH 8.5）中不含EDTA，其收集的DNA 片段可直接用于各种酶促反应等，不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率，请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的片段。
● 请严格按照操作步骤操作。
操作流程：
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
以下是Pfu DNA Polymerase的相关产品：
CLDN11 Polyclonal Antibody 种属 Streptococcus│sp.英文: CLDN11 Polyclonal Antibody应用领域B X
DEFA1 Polyclonal Antibody 种属 Enterobacter│sakazakii英文: DEFA1 Polyclonal Antibody培养方法
RAB23 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│madelia英文: RAB23 Polyclonal Antibody应用领域(1),6,14,25 y 1,7
STAU2 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│reading英文: STAU2 Polyclonal Antibody应用领域4,12 e,h 1,5
CD99 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│oranienburg英文: CD99 Polyclonal Antibody应用领域6,7 m,t -
RPL17 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│sendai英文: RPL17 Polyclonal Antibody应用领域1,9,12 a 1,5
SLC3A2 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│bukavu英文: SLC3A2 Polyclonal Antibody应用领域1,40 l,z28 1,5
CD1D Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│aesch英文: CD1D Polyclonal Antibody应用领域6,8 z60 1,2
ALDH7A1 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│minnesota英文: ALDH7A1 Polyclonal Antibody应用领域21 - -,z33
CHCHD3 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│typhi 27V Reitman strain stre英文: CHCHD3 Polyclonal Antibody应用领域弱毒株,口服菌苗侯选株 9,12,Vi d -
ADH7 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│blegdam英文: ADH7 Polyclonal Antibody应用领域9,12 g,m,q -
SRM Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│niloese英文: SRM Polyclonal Antibody应用领域1,3,19 d z6
ACSL6 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│lexington英文: ACSL6 Polyclonal Antibody应用领域3,10,26 z10 1,5
CCR8 Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│milwaukee英文: CCR8 Polyclonal Antibody应用领域43 fg -
PPP3CA Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│rutgers英文: PPP3CA Polyclonal Antibody应用领域3,10 l, z40 1,7
EEF1G Polyclonal Antibody 种属 Salmonella│greenside英文: EEF1G Polyclonal Antibody应用领域50 z e,n,x
Pfu DNA Polymerase人粒细胞集落刺激因子elisa检测试剂盒
英文名称:Human G-CSF ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:8 pg/ml
检测目标:G-CSF
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验相关实验
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The Polymerase Chain Reaction (PCR)
. Did He Really Invent PCR? • The basic principle of replicating a piece of DNA using two primers had already been described by Gobind Khorana in 1971:– Kleppe et al. (1971) J. Mol. Biol. 56, 341-346. • Progress was limited by primer synthesis and polymerase
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