- ￥447.90 - 2037.90
- 阿拉丁
- 上海
- P665534
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C储存;避免反复冻融
- 英文名：
Phi29 DNA Polymerase
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
P665534-250U/P665534-1250U
| 规格： | P665534-250U | 产品价格： | ￥447.9 |
|---|---|---|---|
| 规格： | P665534-1250U | 产品价格： | ￥2037.9 |
Phi29 DNA Polymerase是从Bacillus subtilis噬菌体phi29中克隆出的DNA聚合酶， 利用基因重组技术，由大肠杆菌表达。本产品具有高效的DNA连续合成能力及链置换 能力，同时具有3'→5'外切酶校读功能，保真度高。本产品可应用于需要强置换和连续 合成的复制反应及中温条件下高保真度复制，如质粒复制、全基因组扩增等。
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活性定义：
在30℃，10分钟内，将0.5 pmol的脱氧核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量定义 为 1个活性单位（U）。
热失活:
65℃温育10 min即可失活。
质量控制：
经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于95%；经检测无核酸内切酶活性， 无宿主残留DNA。 该酶缓冲液中含有还原剂DTT以便保证其最大酶活性，如果缓冲液不新鲜或经过 反复冻融，使用前应添加4 mM的DTT。
应用实例：
利用Phi29 DNA聚合酶的特殊链置换和连续合成特性，可以大大简化用于测序的环 状质粒制备过程。从细菌培养液中扩增质粒：取1 µl对数中后期新鲜培养物用于以下反应。从平板菌落中扩增质粒：挑取琼脂板上的菌落至10 µl（可变）的双蒸水中，混匀， 取1 µl用于以下反应。扩增已纯化的环状质粒：质粒稀释至1 µg/ml，取1 µl用于以下反应。
1．样品加热变性及引物与质粒退火反应：加入以下组分，震荡混匀并短暂离心后，95℃ 加热3 min，然后置于冰上15 min。
2．扩增反应：在上述反应液中加入以下成分，震荡混匀并短暂离心后，30℃温育过夜。
3．65℃加热10 min，热失活Phi29 DNA Polymerase，终止反应。
4．扩增产物经稀释或纯化后即可用于测序。
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文献和实验otherwise. Multiply primed rolling circle amplification (MPRCA) and multiple displacement amplification (MDA) methods are based on the same principle. The DNA amplification is non-PCR based and uses Φ29 DNA polymerase and random hexamer primers for unbiased
PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应，对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么，对于 PCR 反应的核心成份，DNA 聚合酶，你选对了吗？ 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等，常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分，高保真聚合
DNA Sequencing by Capillary Electrophoresis
. To amplify your DNA sample, you need DNA polymerase (such as AmpliTaq® Gold DNA Polymerase), nucleotides (dNTPs), reaction buffer, primers, and a thermal cycler.We offer several tools to help streamline this important step. Our VariantSEQr™ Resequencing
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