高通量Multi-PCR NGS 靶向甲基化位点定量检测

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  • 高通量Multi-PCR NGS 靶向甲基化位点定量
  • 北京西城
  • 2025年07月13日
    • 详细信息
    • 技术资料
    • 提供商

      博淼生物

    • 服务名称

      多重PCR靶向甲基化测序

    MultiPCR 区域甲基化测序服务

    内容简介

          伴随EWAS芯片技术在DNA甲基化的广泛应用,及多基因复杂疾病的表观遗传研究,更多易感的5mC位点及区域发现,由此需要高通量、高准确度、价格低廉的检测技术满足大样本检测的需求。
    博淼生物结合多重PCR扩增子技术和NGS技术,针对靶向区域进行DNA甲基化定量检测。

    技术原理

           多重PCR扩增子NGS靶向DNA甲基化定量技术技术原理,首先通过重亚硫酸盐处理,甲基化的C被保护,而未甲基化的C则被修饰为U;其次通过基于多因素算法设计合成目标区域特异的DNA甲基化多重PCR扩增引物,分别以上述CT处理之后的DNA单链为模板进行目标区域的多重扩增,每个多重PCR反应体系中最多可以容纳100个片段,每个区域长度在100-250bp;再者通过磁珠纯化产物并根据不同反应体系的扩增产物扩增,通过第二轮带有测序接头的通用PCR引物进行扩增建库;最终将建库产物进行超高深度NGS测序,平均测序深度可达1000×以上,根据CpG site中非甲基化和甲基化对应的T和C碱基的测序reads数量进行单个5mC位点的甲基化程度统计。

    服务项目

    项目名称 位点数量 技术特点
    MultiPCR 区域甲基化测序      20-100个片段或>1000× 片段长度约100-150bp,高通量,成本低廉,是EWAS芯片二期靶向位点验证的理想技术选择之一。
     

    技术优势

    ·整体DNA甲基化技术解决方案
    ·超高重的测序深度
    ·完善而创新的EWAS芯片位点优化策略
    ·丰富的引物设计经验

    服务流程
    位点信息提供-方案设计-预实验-正式实验-数据分析

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