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TOSOH BIOSCIENCE
SkillPak 1 mL和5 mL层析柱主要用于快速实现纯化方法的开发及优化、填料的筛选以及样品的浓缩。两种不同尺寸层析柱都预装填了各类TOYOPEARL、TSKgel以及Ca++Pure-HA羟基磷灰石填料,能够对单克隆抗体、蛋白质、寡核苷酸以及病毒进行出色的纯化评价、评估。
SkillPak 1 mL和5 mL预装柱为从平台工艺开发到中试规模纯化而设计。这类预装层析柱一经收到即可立即投入使用,由于具有优异的刚性强度和理想的压力/流速特性,尤其适合下游纯化工艺。
SkillPak层析柱性能卓越、稳定可靠,可与常用的低压或中压液相色谱/层析系统配合使用。该类层析柱不仅可以重复再生使用,还充分考虑了每种填料不同的装填压缩比。因此,能够精确展示各种尺寸层析柱的代表性状态。
SkillPak 1 mL层析柱的规格参数:

SkillPak 5 mL层析柱的规格参数:

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文献和实验或超声清洗(HiPrep 与 Precision Columns 3.2/300 柱型不能拆卸换膜);必要时移除层析柱顶端 2~3 mm 凝胶,调节 Adaptor 消除顶端死体积。部分预装柱,也可以将填料倒出,去除板结或碎填料后,重新装填。测定柱效或重复之前做过的样品。后续注意样品前处理(如核酸的去除、样品缓冲液条件)以及层析柱的日常维护。 图 1:凝胶过滤分离原理 绝招二:凝胶过滤层析的三大应用种类 根据应用目的的不同
凝胶过滤层析原理 凝胶过滤层析是根据分子大小和形状的差异进行分离的一种简单可靠的层析技术。当生物分子通过凝胶过滤填料时,分子量大的生物分子只能通过大的孔径,小分子量的生物分子会经过小的孔径,因此和大分子量的生物分子相比,小分子量的生物分子经过的路程会更长。凝胶过滤层析的全过程只用一种缓冲液即可将不同分子量的生物分子进行分离。 特点 填料主要为惰性(无反应性或吸附性)的球状疏松多孔颗粒,具有均匀的分离范围 目标分子不与介质结合,通常仅需一种缓冲液 缓冲液成分不直接影响分辨率(即峰之间的分离
1. 去垢剂类型和特点表 常用的去垢剂大概有十几种,根据膜蛋白分子量可选用下面两根预装柱进行快速筛选: 表 2. 用两根预装柱快速筛选去垢剂结果表 运行流速设为 0.5 mL/min,15 min 以内就可以筛选一个去垢剂,而且上样量 5-50μL,可节省样品。 标签 摸索得到合适的去垢剂之后,就可以进行常规的层析实验。 增溶之后,高速离心取上清过亲和层析柱,为了减少后续的处理步骤,往往设计较小的标签,一般使用 HIS 或者 Strep,如果使用 GST 标签,则需要引入酶切位点。 标签










