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52
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详见说明书
- CAS号：
详见说明书
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
4°C保存
- 规格：
100T/盒
试剂盒组份：
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
参数规格：
产品名称 SRM mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒
特异性: 大鼠
标记方式: 3’—尾段标记
保存条件: 4°C保存一年
试剂盒内容:
1.SRM寡核苷酸探针杂交液 2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.胃蛋白酶（×10;Pepsin） 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
产品具有以下优点：
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
2、规范包被操作----吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
3、先进的优化方案----重复性高，可靠性强
4、购买本公司的SRM mRNA原位杂交试剂盒免费代测
5、技术服务要求：专业，规范，高效
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
7、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
8、可检测指标齐全：炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
9、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，先进的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴。
下列产品是公司正在热销的产品：
ACKR3 Polyclonal AntibodyCaspase-5活性测定试剂盒英文名称: ACKR3 Polyclonal Antibody细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD，与ICE有51%的同源性，在过量表达时可诱导凋亡发生。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA)，释放出游离的硝胺pNA，后者呈黄色在405nm具有最大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定，吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。反应体系100微升，试剂盒提供的试剂，除标准曲线外可进行50或100次样品测定。
ATG9B Polyclonal Antibody细胞生物学>细胞英文名称: ATG9B Polyclonal Antibody
MAP2K6 Monoclonal Antibody人慢性髓系白血病细胞；K562宿主: Mouse形态特性：淋巴母细胞样
HES5 Polyclonal Antibody人胚肺成纤维细胞；WI-38英文名称: HES5 Polyclonal Antibody生长特性：贴壁生长
LMNB2 Monoclonal Antibody小鼠单核巨噬细胞白血病细胞；RAW264.7宿主: Mouse形态特性：不规则圆形
WISP2 Polyclonal AntibodySV40T转化人脐静脉内皮细胞；PUMC-HUVEC-T1英文名称: WISP2 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
SDC4 Polyclonal AntibodyJurkat,CloneE6-1人T淋巴细胞白血病细胞英文名称: SDC4 Polyclonal Antibody形态特性：淋巴母细胞样
HDAC3 Polyclonal Antibody293T，人胎肾细胞英文名称: HDAC3 Polyclonal Antibody生长特性：贴壁生长
HSD3B2 Polyclonal Antibody人急性早幼粒白血病细胞；HL-60英文名称: HSD3B2 Polyclonal Antibody形态特性：髓母细胞样
AFP Polyclonal Antibody人肺癌细胞；A549英文名称: AFP Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
HSPA5 Monoclonal Antibody人急性单核细胞白血病细胞；THP-1宿主: Mouse形态特性：单核细胞
CCND1 Polyclonal Antibody小鼠胚胎成纤维细胞，NIH3T3英文名称: CCND1 Polyclonal Antibody形态特性：成纤维细胞样
NUP98 Monoclonal Antibody小鼠黑色素瘤细胞；B16英文名称: NUP98 Monoclonal Antibody形态特性：梭形
WDR45 Polyclonal Antibody人口腔表皮样癌细胞；KB英文名称: WDR45 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
CASP9 Polyclonal Antibody小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞)；YAC-1英文名称: CASP9 Polyclonal Antibody形态特性：淋巴母细胞样
CAPN2 Polyclonal Antibody小鼠前列腺癌细胞；RM-1英文名称: CAPN2 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
SRM mRNA原位杂交试剂盒英文名称:Flavobacterium tegetincola
菌种又名:
中文名称:栖菌垫黄杆菌
其他收藏编号:ACAM 602, LMG 21423
菌种代号:
分离来源:蓝藻垫
分离国家:南极洲
来源历史:<- LMG; LMG 21423 <- J. Bowman, School of Agricultural Sci., Univ. Tasmania, Australia
培养条件:
DSM Medium 830 , 20°C
菌种说明:<- LMG; LMG 21423 <- J. Bowman, School of Agricultural Sci., Univ. Tasmania, Australia. Cyanobacterial mat; Antarctica, Vestfold Hills, the marine salinity meromictic Ace Lake. Type strain. Taxonomy/description (7752). Sequence accession number(s): U85887 (7752). (Medium 830, 20°C).
生物安全等级:1
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
参数规格：
产品名称 SRM mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒
特异性: 大鼠
标记方式: 3’—尾段标记
保存条件: 4°C保存一年
试剂盒内容:
1.SRM寡核苷酸探针杂交液 2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.胃蛋白酶（×10;Pepsin） 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
产品具有以下优点：
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
2、规范包被操作----吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
3、先进的优化方案----重复性高，可靠性强
4、购买本公司的SRM mRNA原位杂交试剂盒免费代测
5、技术服务要求：专业，规范，高效
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
7、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
8、可检测指标齐全：炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
9、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，先进的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴。
下列产品是公司正在热销的产品：
ACKR3 Polyclonal AntibodyCaspase-5活性测定试剂盒英文名称: ACKR3 Polyclonal Antibody细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD，与ICE有51%的同源性，在过量表达时可诱导凋亡发生。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA)，释放出游离的硝胺pNA，后者呈黄色在405nm具有最大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定，吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。反应体系100微升，试剂盒提供的试剂，除标准曲线外可进行50或100次样品测定。
ATG9B Polyclonal Antibody细胞生物学>细胞英文名称: ATG9B Polyclonal Antibody
MAP2K6 Monoclonal Antibody人慢性髓系白血病细胞；K562宿主: Mouse形态特性：淋巴母细胞样
HES5 Polyclonal Antibody人胚肺成纤维细胞；WI-38英文名称: HES5 Polyclonal Antibody生长特性：贴壁生长
LMNB2 Monoclonal Antibody小鼠单核巨噬细胞白血病细胞；RAW264.7宿主: Mouse形态特性：不规则圆形
WISP2 Polyclonal AntibodySV40T转化人脐静脉内皮细胞；PUMC-HUVEC-T1英文名称: WISP2 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
SDC4 Polyclonal AntibodyJurkat,CloneE6-1人T淋巴细胞白血病细胞英文名称: SDC4 Polyclonal Antibody形态特性：淋巴母细胞样
HDAC3 Polyclonal Antibody293T，人胎肾细胞英文名称: HDAC3 Polyclonal Antibody生长特性：贴壁生长
HSD3B2 Polyclonal Antibody人急性早幼粒白血病细胞；HL-60英文名称: HSD3B2 Polyclonal Antibody形态特性：髓母细胞样
AFP Polyclonal Antibody人肺癌细胞；A549英文名称: AFP Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
HSPA5 Monoclonal Antibody人急性单核细胞白血病细胞；THP-1宿主: Mouse形态特性：单核细胞
CCND1 Polyclonal Antibody小鼠胚胎成纤维细胞，NIH3T3英文名称: CCND1 Polyclonal Antibody形态特性：成纤维细胞样
NUP98 Monoclonal Antibody小鼠黑色素瘤细胞；B16英文名称: NUP98 Monoclonal Antibody形态特性：梭形
WDR45 Polyclonal Antibody人口腔表皮样癌细胞；KB英文名称: WDR45 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
CASP9 Polyclonal Antibody小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞)；YAC-1英文名称: CASP9 Polyclonal Antibody形态特性：淋巴母细胞样
CAPN2 Polyclonal Antibody小鼠前列腺癌细胞；RM-1英文名称: CAPN2 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
SRM mRNA原位杂交试剂盒英文名称:Flavobacterium tegetincola
菌种又名:
中文名称:栖菌垫黄杆菌
其他收藏编号:ACAM 602, LMG 21423
菌种代号:
分离来源:蓝藻垫
分离国家:南极洲
来源历史:<- LMG; LMG 21423 <- J. Bowman, School of Agricultural Sci., Univ. Tasmania, Australia
培养条件:
DSM Medium 830 , 20°C
菌种说明:<- LMG; LMG 21423 <- J. Bowman, School of Agricultural Sci., Univ. Tasmania, Australia. Cyanobacterial mat; Antarctica, Vestfold Hills, the marine salinity meromictic Ace Lake. Type strain. Taxonomy/description (7752). Sequence accession number(s): U85887 (7752). (Medium 830, 20°C).
生物安全等级:1
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文献和实验相关实验
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试剂盒 公司 型号 次数 价格 推荐指数 mRNA提取 生工 SK1411 10次 750 SK1412 20次 1100 mRNA提取 invi K1580-96 TAKARA 23006 6 rxns 7059 mTRAPTMMaxi 23506 5 x 6 rxns 30019
相机拍照时，上色的 RNA 胶要尽可能少接触紫外光，若接触太多或白炽灯下暴露过久，会使 RNA 信号降低。从琼脂糖凝胶中分离功能完整的 mRNA 时，甲基氢氧化汞是一种强力、可逆变性剂，但是有毒，因而许多人喜用甲醛作为变性剂。所有操作均应避免 RNase 的污染。5. 组织原位杂交（Tissue in situ hybridization）简称原位杂交，指组织或细胞的原位杂交，它与菌落的原位杂交不同，菌落原位杂交需裂解细菌释出 DNA，然后进行杂交。而原位杂交是经适当处理后，使细胞通透性增加
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
SRM mRNA原位杂交试剂盒
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