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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
47
- 英文名:
Bovine IgG
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
储存条件: -20°C
- 规格:
瓶
产品名称:牛IgG干粉
英文名称: Bovine IgG
储存条件: -20℃
纯度: 每20mg干粉含10mg牛IgG。
单位: 瓶
免疫球蛋白(IgG)广泛地应用于免疫学及分子生物学中各个分支学科的研究领域,它即可作为大分子球蛋白用于生物化学的研究,也可以作为抗原用于免疫学和临床医学之中。我们采用分段饱和硫酸铵盐析与弱碱性阴离子交换层析的方法,纯化各种人与动物血清(IgG冷冻干燥或液体)。每种产品可达到免疫电泳、聚凝胶电泳纯。
应用范围:
1.可作参考蛋白,分子量15.5万;
3.作抗原使用:
(1)免疫动物
(2)测定对应抗体
(3)吸收杂抗体的抗原,当制成抗IgA、抗IgM,如果与IgG有交叉反应时,用IgG作抗原吸收去杂抗体。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
| 产品名称 | 牛IgG干粉 |
| 英文名称 | Bovine IgG |
| 货号 | BH-DB1072 |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL~1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用:
1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1.单纯固定液
(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效
以下是牛IgG干粉的相关产品:
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文献和实验预培养于含有叠氮钠和二抗来源物种正常血清的缓冲液中。 注意:当使用的是带标记的二抗时,千万不能用一抗来源物种的正常血清和 IgG 来封闭。如果血清中的免疫球蛋白非特异性的结合到样品上,他们会被带有标记的二抗识别,导致背景过高。 牛血清白蛋白( BSA )和奶粉是最为常用的封闭液,它们可能含有 IgG, 除了牛抗羊 IgG 外,许多二抗如抗牛,抗山羊,抗绵羊与牛 IgG 有较强的反应。因此,使用 BSA 或奶粉封闭或稀释抗体会增加背景或降低抗体效价。推荐用来自二抗的物种的正常血清( 5% v
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