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有效期1年
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上海博湖
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储存条件:-20℃,避光,有效期:至少1年
- 规格:
瓶
产品名称:胞浆蛋白提取试剂盒
储存条件:-20℃,避光,有效期:至少1年
单位:盒
胞浆蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取胞质蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为温和,可获得蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。
操作方法:
1、组织总蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀,放置在冰上备用;
称取0.1g的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作;
将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g离心30min;
吸取上清至新的管中;
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80 oC,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
裂解液的用量:107个细胞需要裂解液1ml;
贴壁细胞:弃去培养基,用冷的PBS洗两次,弃去PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,
将刮离的细胞裂解液移入EP管中,颠倒裂解20-30min
悬浮细胞:4 oC 400g离心收集细胞,用冷的PBS洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,
涡旋10s,放置冰上裂解10min,重复3-4次;
裂解完毕之后,将细胞裂解液4 oC 12000g离心30min;
将上清移入新的EP管中;
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80 oC,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
| 产品名称 | 胞浆蛋白提取试剂盒 |
| 英文名称 | |
| 货号 | BH-DB006 |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL~1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用:
1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1.单纯固定液
(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效
以下是胞浆蛋白提取试剂盒的相关产品:
磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体 Anti-phospho-ATP citrate lyase WB IHC-P
磷酸化ATR抗体 Anti-phospho-ATR WB IHC-P
细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体 Anti-AMN1 WB IHC-P
天门冬酰胺连接糖基化11抗体 Anti-ALG11 WB IHC-P
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低密度脂蛋白受体相关蛋白12抗体 Anti-LRP12 WB IHC-P
磷酸化相似肿瘤抑制基因HUGL抗体 Anti-phospho-LLGL1 + LLGL2 WB IHC-P
低密度脂蛋白受体抗体 Anti-LDL receptor WB IHC-P
瘦素抗体 Anti-Leptin WB IHC-P
乳腺肿瘤自身抗原抗体LMO4抗体 Anti-LMO4 WB IHC-P
细孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:20-60目,层析用 小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
细孔柱层析硅胶(100-200目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:100-200目,层析用 小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA检测试剂盒Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T
细孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:300-400目,层析用 小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 ,英文名: aGT ELISA Kit
大孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:20-60目,层析用 小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA检测试剂盒MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 96T/48T
大孔柱层析硅胶(100-200目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:100-200目,层析用 小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 ,英文名: ACE ELISA Kit
大孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:300-400目,层析用 小鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)ELISA试剂盒 ,英文名: ACE2 ELISA Kit
硅酸(>98%,BC) Silicic acid hydrate 质量规格:>98%,BC 小鼠血管紧张素转换酶(ACE)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
一氧化硅(>99%,BR) Silicon monoxide 质量规格:>99%,BR 小鼠血管内皮钙黏蛋白(CDH5)ELISA试剂盒 ,英文名: CDH5 ELISA Kit
钨硅酸(>98%,BR) Silicotungstic acid hydrate 质量规格:>98%,BR 小鼠血管内皮生长因子A(VEGFA)ELISA试剂盒 ,英文名: VEGFA ELISA Kit
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小鼠血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA试剂盒 ,英文名: ANGⅡ ELISA Kit 粗孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:20-60目,层析用
小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 ,英文名: ANG-Ⅱ ELISA Kit 粗孔柱层析硅胶(100-200目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:100-200目,层析用
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小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 细孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:20-60目,层析用
小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA检测试剂盒Mouseangiotensinogen,aGT 96T/48T 细孔柱层析硅胶(100-200目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:100-200目,层析用
小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 ,英文名: aGT ELISA Kit 细孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:300-400目,层析用
小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA检测试剂盒MouseAngiotensinconveingenzyme,ACE 96T/48T 大孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:20-60目,层析用
小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 ,英文名: ACE ELISA Kit 大孔柱层析硅胶(100-200目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:100-200目,层析用
小鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)ELISA试剂盒 ,英文名: ACE2 ELISA Kit 大孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade) Silica gel for column chromatography 质量规格:300-400目,层析用
小鼠血管紧张素转换酶(ACE)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 硅酸(>98%,BC) Silicic acid hydrate 质量规格:>98%,BC
胞浆蛋白提取试剂盒Mousecatecholamine,CAELISA试剂盒小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 木犀草素OβD葡萄糖苷 HPLC≥98% 10mg
小鼠血清总补体(CH50)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 阿特拉津 HPLC≥97% 200mg
Rat dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 大鼠多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒 表丁香脂素 HPLC≥95% 5mg
Humanβmannosidase,βManaseELISAKit 人β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 皮树脂醇 HPLC≥97% 5mg
CLIAKitfor(CTX-I)ELISAKit大鼠Ⅰ型胶原C端肽规格:48T/96T 异噁酰草胺 HPLC≥98% 10mg
荧光或共聚焦显微镜制片封片处理液(荧光稳定、永久保存)5/20毫升 十七酸 GC≥98% 20mg
MouseIerleukin18,IL-18ELISAKit小鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒规格:96T/48T L硒代胱氨酸 HPLC≥98% 20mg
小鼠血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒 ,英文名: ST ELISA Kit 香菇多糖 UV≥98%,鉴别 20mg
小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA检测试剂盒MousecyclophilinA,CyPAELISAKit 96T/48T 盐酸利多卡因? HPLC≥98% 100mg
人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒 Human Maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit GC≥98% 250mg
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP419) ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
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