- 询价
- 博湖
- BH-DB018
- 进口、国产
- 2025年07月15日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Nuclear Protein Extraction Kit
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
附件PMSF-20℃，其它试剂4℃。
- 规格：
瓶
产品名称：核蛋白提取试剂盒
别名:细胞核蛋白提取试剂盒
英文名称:Nuclear Protein Extraction Kit
储存条件:附件PMSF-20℃，其它试剂4℃。有效期:1年
单位:瓶
产品简介： 本核蛋白提取试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。得到的蛋白可以用于Western blot等实验。本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂，释放出胞浆蛋白，再通过离心得到细胞核。然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。本试剂盒可以抽提50/100个样品（每个样品约2×106个Hela细胞或40mg组织）。
规格：50T/100T
保存：核/浆蛋白抽提试剂4℃保存，PMSF于-20 ℃保存。
操作方法：
裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
一、对于体外培养细胞：
1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。PMSF需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸，可以在两种蛋白抽提液中加入DTT至终浓度0.5mM。
2．对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用EDTA消化后吹打下细胞（最好不用胰酶硝化，以免胰酶消化目的蛋白）。500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。
3．对于悬浮细胞：用PBS洗一遍，500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
4．每20μl细胞沉淀加入200μl浆蛋白抽提试剂（2×106个细胞沉淀的体积约20μl或40mg）。
5．用移液器吹打或高速涡旋15秒（可适当延长），必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。
6．冰浴10分钟。
7．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃ 12000～16000g离心10分钟。
8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的PAGE、Western等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。
9．沉淀即为细胞核，要完全吸尽残余的上清（避免细胞浆蛋白的污染），加入50-100μl核蛋白抽提试剂。
10．用移液器吹打或高速涡旋15秒（可适当延长）至沉淀完全分散，冰浴10分钟。
11．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃12000～16000g离心10分钟。12．立即吸取上清至预冷的样品管中，此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。对于组织样品：把组织称重后，尽可能切成非常细小的碎片，按每50mg组织加入200μl-500μl PBS，用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液，500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，收集沉淀。加入200μl浆蛋白抽提试剂后接上述步骤5。
| 产品名称 | 核蛋白提取试剂盒 |
| 英文名称 | Nuclear Protein Extraction Kit |
| 货号 | BH-DB018 |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL～1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL～0.5 mL |
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用：
1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7 2～7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1．单纯固定液
(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效
以下是核蛋白提取试剂盒的相关产品：
肌萎缩侧索硬化症相关蛋白4抗体 Anti-ALS2CR4 WB IHC-P
α2巨球蛋白抗体 Anti-alpha 2 Macroglobulin WB IHC-P
ACCSL蛋白抗体 Anti-ACCSL WB IHC-P
β淀粉样前体蛋白结合蛋白3抗体 Anti-Mint3 WB IHC-P
星形肌动蛋白抗体 Anti-ASTN2 WB IHC-P
亮氨酸拉链转录因子样1抗体 Anti-LZTFL1 WB IHC-P
层粘连蛋白B2γ1抗体 Anti-Laminin B2 gamma 1 WB IHC-P
磷酸化T细胞活化连接蛋白抗体 Anti-Phospho-LAT WB IHC-P
低密度脂蛋白受体相关蛋白1抗体 Anti-LRP1/CD91 WB IHC-P
磷脂酰基转移酶2抗体 Anti-LPCAT2 WB IHC-P
五水合硫酸司巴丁 HPLC≥98% 20mg Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISAKit 人葡萄糖60酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
五味子丙素 HPLC≥98% 20mg HumanGlucoseanspoer1,GL1ELISAKit 人葡萄糖转运蛋白1(GL1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
五味子醇甲 HPLC≥98% 20mg HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 人糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
五味子醇乙 HPLC≥98% 20mg HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
五味子酚 HPLC≥98% 20mg HumanglycolipidaoaibodyELISAKit 人抗糖脂抗体(glycolipid)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
五味子酚乙 HPLC≥98% 5mg Humanglycophosphatidylinositol,GPIELISAKit 人糖0脂酰肌醇(GPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
五味子甲素 HPLC≥98% 20mg humangonadoopin-releasinghormone,GHELISAKit 人促性腺激素释放激素(GH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
五味子乙素 HPLC≥98% 20mg HumanGTPaseactivatingprotein,GAPELISAKit 人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
五味子酯甲 HPLC≥98% 20mg HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISAKit 人鸟苷酸解离抑制因子(GDI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
五味子酯戊 HPLC≥97% 20mg Humanheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 人热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPI 人葡萄糖60酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五水合硫酸司巴丁 HPLC≥98% 20mg
HumanGlucoseanspoer1,GL1 人葡萄糖转运蛋白1(GL1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子丙素 HPLC≥98% 20mg
HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BB 人糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子醇甲 HPLC≥98% 20mg
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-II 人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子醇乙 HPLC≥98% 20mg
Humanglycolipidaoaibody 人抗糖脂抗体(glycolipid)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子酚 HPLC≥98% 20mg
Humanglycophosphatidylinositol,GPI 人糖0脂酰肌醇(GPI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子酚乙 HPLC≥98% 5mg
humangonadoopin-releasinghormone,GH 人促性腺激素释放激素(GH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子甲素 HPLC≥98% 20mg
HumanGTPaseactivatingprotein,GAP 人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子乙素 HPLC≥98% 20mg
HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDI 人鸟苷酸解离抑制因子(GDI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子酯甲 HPLC≥98% 20mg
Humanheatshockprotein27,HSP-27 人热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子酯戊 HPLC≥97% 20mg
核蛋白提取试剂盒Mousec-junELISA试剂盒小鼠c-junELISA试剂盒规格：96T/48T 富马酸二甲酯 GC≥98% 250mg
小鼠血管生长素(ANG)ELISA试剂盒 ，英文名： ANG ELISA Kit 对乙烯基愈疮木酚 GC≥98% 20mg
小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA检测试剂盒Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 96T/48T 磺胺对甲氧嘧啶 HPLC≥98% 100mg
人肌质/内质网钙ATP酶(ATP2A1)试剂盒 Human ATP2A1 ELISA Kit 萘酚磺酸钾 HPLC≥98% 20mg
RatCiatesyhase,CSELISAKit大鼠柠檬酸合酶(CS)ELISA试剂盒规格：96T/48T 磺胺异恶唑 HPLC≥98% 250mg
10倍TBS浓缩缓冲溶液100毫升 盐酸环丙沙星 HPLC≥98% 20mg
MouseClaracellprotein,CC16ELISA试剂盒小鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒规格：96T/48T 高紫檀素 HPLC≥98% 5mg
小鼠血管生长素(ANG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 杠柳毒苷元 HPLC≥98% 20mg
Rat calcium / calmodulin depende protein kinase 2 (CAMK 2) ELISA Kit 大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA试剂盒 甘油三酯 GC≥98% 20mg
HumanarylsulfataseA,ASAELISAKit 人芳基硫酸酯酶A(ASA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 α酮戊二酸 HPLC≥98% 20mg
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 新鲜血液样品（ 200 μl ）2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物样品（10-20 mg），研钵，液氮2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南（DP419） ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头（200 μl ，1ml），1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 涡旋振荡器，台式低温离心机实验准备-试剂盒准备：第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
核蛋白提取试剂盒
询价
