细菌蛋白提取试剂盒

产品名称：细菌蛋白提取试剂盒
储存条件:-20℃，避光，有效期:至少1年
细菌蛋白提取试剂盒用于大肠杆菌提取可溶性蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂，作用较为强烈，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶的研究。细菌蛋白提取试剂盒仅用于科研。
操作方法:
1、细菌可溶性蛋白的提取

产品名称	细菌蛋白提取试剂盒
英文名称
货号	BH-DB005

在1ml的冷裂解液中各加入10ul的蛋白酶抑制剂和PMSF；混匀，放置在冰上备用；
将菌体湿重称重，然后按照比例（1g：10ml）加入的新配置的裂解液，混匀，过程注意冰上操作；
将混匀液移入超声仪中，超声；
超声条件：总时间45min，超声时间3s，间隔时间3s，过程为冰浴环境；
超声结束，w4度离心，10000r/min20min；
吸取上清至新的管中；
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)

操作步骤：
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
 1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2．  每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

细胞数量	Lysis Buffer加入量
107个	0.5 mL～1 mL
5×106个	0.2 mL～0.5 mL

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
以下是细菌蛋白提取试剂盒的相关产品：
磷酸化失调症蛋白1抗体  Anti-phospho-ATXN1   WB IHC-P
脊髓小脑失调症蛋白1抗体  Anti-ATXN1/Ataxin-1  WB IHC-P
乙酰辅酶A羧化酶抗体  Anti-Acetyl CoA Carboxylase  WB IHC-P
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体  Anti-phospho-AMPK alpha-1  WB IHC-P
磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体  Anti-phospho-ATM  WB IHC-P
唾液过氧化物酶LPO抗体  Anti-Lactoperoxidase  WB IHC-P
溶菌酶抗体  Anti-lysozyme  WB IHC-P
LAD1蛋白抗体  Anti-LAD1  WB IHC-P
胸腺生成素LAP2抗体  Anti-LAP2 alpha  WB IHC-P
富含亮氨酸重复蛋白6抗体  Anti-LRRC6  WB IHC-P
仙鹤草酚B TLC鉴别用 10mg HumanmembraneIgM,mIgMELISAKit 人表面膜球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
仙鹤草酚D HPLC≥98% 20mg HumanMetallothionein,MTELISAKit 人金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
仙茅苷 HPLC≥98% 20mg HumanMethemoglobin,MHBELISAKit 人高铁血红蛋白(MHB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
纤精酮 HPLC≥98% 20mg HumanMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
纤细薯蓣皂苷 HPLC-ELSD≥98% 20mg Humanmyelinassociatedglycoproteinaoaibody,MAGELISAKit 人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
莶精醇 HPLC≥98% 20mg Humanneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
腺苷 HPLC≥99% 20mg Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神经氨酸酶(NA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
腺嘌呤 HPLC≥98% 20mg HumanNeurokininsB,NKBELISAKit 人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
相思豆 HPLC≥98% 20mg Humanneuronalapoptosisinhibitoryprotein,NAIPELISAKit 人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
相思子碱 HPLC≥95% 20mg HumanNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 人神经生长导向因子Slit2ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanmembraneIgM,mIgM 人表面膜球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 仙鹤草酚B TLC鉴别用 10mg
HumanMetallothionein,MT 人金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 仙鹤草酚D HPLC≥98% 20mg
HumanMethemoglobin,MHB 人高铁血红蛋白(MHB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 仙茅苷 HPLC≥98% 20mg
HumanMucin-5subtypeAC,MUC5AC 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 纤精酮 HPLC≥98% 20mg
Humanmyelinassociatedglycoproteinaoaibody,MAG 人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 纤细薯蓣皂苷 HPLC-ELSD≥98% 20mg
Humanneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGAL 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 莶精醇 HPLC≥98% 20mg
Humanneuraminidase,NA 人神经氨酸酶(NA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 腺苷 HPLC≥99% 20mg
HumanNeurokininsB,NKB 人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 腺嘌呤 HPLC≥98% 20mg
Humanneuronalapoptosisinhibitoryprotein,NAIP 人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 相思豆 HPLC≥98% 20mg
HumanNeuronalChemorepelleSlit2 人神经生长导向因子Slit2ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 相思子碱 HPLC≥95% 20mg
细菌蛋白提取试剂盒Rat dopamine D1 receptor (D1R) ELISA Kit 大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒 毛冬青皂苷B HPLC≥98% 20mg
Humanβ-hexosaminidaseAELISAKit 人β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 毛冬青皂苷B HPLC≥98% 20mg
CLIAKitfor(EGFR)ELISAKit大鼠表皮生长因子受体规格：48T/96T 毛冬青皂苷B HPLC≥98% 20mg
荧光定量PCR分析20样本 ’去甲基去氢鬼臼 HPLC≥98% 20mg
MouseIerleukin1β,IL-1βELISAKit小鼠白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒规格：96T/48T 菠菜甾醇OβD葡萄糖苷 HPLC≥98% 5mg
小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒 ，英文名： CH50 ELISA Kit 羟基巴戟醌 HPLC≥98% 20mg
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA检测试剂盒MouseBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit 96T/48T 印乌碱 HPLC≥98% 20mg
人基质金属蛋白酶25(MMP25)试剂盒 Human maix metallopeptidase 25,MMP25 ELISA kit 橘红素 HPLC≥98% 20mg
RatCathepsinK,cath-KELISAKit大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒规格：96T/48T 醋酸氯己定     HPLC≥98% 100mg
10倍MOPS分子生物级浓缩缓冲溶液500毫升 α胆甾烷 HPLC≥98% 20mg
固定液的应用：
1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7 2～7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1．单纯固定液
(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效