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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
58
- 英文名:
详见说明书
- CAS号:
详见说明书
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
4°C保存
- 规格:
100T/盒
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
参数规格:
产品名称 CD63 mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒
特异性: 人、大鼠、小鼠
标记方式: 3’—尾段标记
保存条件: 4°C保存一年
试剂盒内容:
1.CD63寡核苷酸探针杂交液 2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.胃蛋白酶(×10;Pepsin) 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
产品具有以下优点:
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
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Anti-PPP4C Monoclonal Antibody英文名称: Anti-C1GALT1C1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H22O2性状:Powder纯度:85.0%
Anti-PPP4C Polyclonal Antibody英文名称: Anti-SNRPB2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C16H24O2性状:Oil纯度:%
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Anti-PRAME Polyclonal Antibody英文名称: Anti-ABCC2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C19H24O6性状:Powder纯度:98.0%
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Anti-PRC1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-IL5RA Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C17H22O5性状:Powder纯度:96.0%
Anti-PRCP Polyclonal Antibody英文名称: Anti-ELAVL3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H22O5性状:Powder纯度:98.5%
Anti-PRDM14 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-SLC39A7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H22O5性状:Cryst.纯度:93.0%
Anti-PRDM2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-PDCD6IP Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H22O4性状:Powder纯度:98.5%
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Anti-PRDM7 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-EVA1A Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C28H38O7性状:Yellow powder纯度:95.5%
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Anti-PRDX1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-SMARCA1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C28H40O6性状:Powder纯度:98.0%
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CD63 mRNA原位杂交试剂盒人组织蛋白酶L检测试剂盒
英文名称:Human Cathepsin L ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:30 pg/ml
检测目标:Cathepsin L
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验CD63 分子 CD63 常用单克隆抗体或代号: RUU- SP2.28,CLB 主要表达细胞: Pt,M,Mac,(G,T,B) [Pt] 分子质量(kDa)和结构: gp53,血小板颗粒蛋白(TM4- SF) 功 能: 血小板活化,中性粒细胞- 活化内皮细胞粘附 CD63 Aka lysosomal-membrane-associated glycoprotein 3, LAMP
原位杂交法测定TNF的mRNA 原位杂交 【试剂及配制】 (1) TNF-DNA探针 (2) 地高辛标记液试剂盒 (3) 杂交液:60%去离子甲酰胺,300mmol/L NaCl、30mmol/L柠檬酸钠、10mmol/L EDTA 25mmol/L NaH2 PO4 (pH7.4),5%葡聚糖硫酸酯,250μg/μl变性鲑精DNA (4) 设备:温箱,水浴
试剂盒 公司 型号 次数 价格 推荐指数 mRNA提取 生工 SK1411 10次 750 SK1412 20次 1100 mRNA提取 invi K1580-96 TAKARA 23006 6 rxns 7059 mTRAPTMMaxi 23506 5 x 6 rxns 30019
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