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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
TNFRSF4人源基因
- 细胞类型:
贴壁生长
- 肿瘤类型:
贴壁生长
- 供应商:
上海莼试
- 库存:
55
- 英文名:
详见说明书
- 生长状态:
详见说明书
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
免费包邮
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
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- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
| 产品名称 | TNFRSF4人源基因说明书 |
| 类型 | 贴壁生长 |
| 编号 | CS-X3944 |
种属:质粒干粉
模式:菌株未知
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
RelB(Ser552) 磷化转录因子RelB蛋白抗体 规格 0.1ml
Rat IgM (亲和纯化) 大鼠IgMMulti-class antibodies规格: 1mg
Anti-CD4/HRP 辣根过物酶标记CD4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Mink IgG 水貂IgG (亲和纯化)Multi-class antibodies规格: 1mg
人类白细胞抗原E Anti-HLA-E 0.1ml
Rabbit Anti-Avidin 兔抗亲和素 1mg
FoxP1 英文名称: 叉头蛋白P1抗体 0.2ml
TNFRSF4人源基因说明书AVPR1B 英文名称: 抗利尿激素受体1B抗体 0.2ml
Anti-phospho-Afadin(Ser1718) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
PRL(mouse prolactin) ELISA Kit 小鼠催乳素Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-CD59/FITC 荧光素标记反应性溶血膜抑制蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
DPV(Duck plague virus) 鸭瘟病毒DPV抗体 规格 0.2ml
MHB(Rat Methemoglobin,MHB) ELISA Kit 大鼠高铁血红蛋白 96T
MAP1A 英文名称: 微管相关蛋白1A抗体 0.1ml
注意事项:
TNFRSF4人源基因说明书实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作;每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面;
操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作;无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作;
小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。操作过程中,应避免引起aerosol之产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。
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文献和实验一、实验目的 学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。 二、实验原理 上图所示是脂质体介导转染的示意图,它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。 外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入
HEK-293 293A 293S 293T 293FT区别比较
腺病毒的,293T是用来包慢病毒的,是否还有其他293细胞,比如293S 课题需要做腺病毒转染,看了initrogen的说明书上说用293A细胞。在clontech的说明书上就是293细胞。 293细胞比较容易转染,是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的一个衍生株:293T/17的转染效率更高,成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具。 293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。如果一个实验室新得到
问:手上有U251细胞,pEGFP载体,现在将不带外源基因的载体转u251的效率都很低,10%都没有。所用转染试剂:invitrogen的Lipofectamine 2000和威格拉斯的Vigofect,效率都很低,试过不同细胞密度,不同的DNA和转染试剂的比值,还是不行。各位高人有没有什么建议,另外转染的时候使用有血清的培养基养细胞,不知道影响大不大(说明书上说没有影响),稀释DNA和转染试剂是无血清的培养基,还有就是细胞是很久以前的了,传代较多不知道行不行。答:lipo最好
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