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- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
幼兔肺成纤维样细胞
- 细胞类型:
贴壁生长
- 肿瘤类型:
贴壁生长
- 供应商:
上海莼试
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37
- 英文名:
NULL
- 生长状态:
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- 年限:
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- 器官来源:
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- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
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- 免疫类型:
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- 物种来源:
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- 相关疾病:
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- 组织来源:
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- 规格:
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| 产品名称 | 幼兔肺成纤维样细胞说明书 |
| 类型 | 贴壁生长 |
| 编号 | CS-X4336 |
种属:NULL
形态:成纤维样细胞
培养方法
培养基:DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
生长特性:贴壁生长
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
p95 NBS1(Ser343) 磷化滑膜细胞凋亡抑制物1抗体 规格 0.1ml
VTG(vitellogenin) 青鳉鱼卵黄蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1mg
POMC(Human pro-opiomelanocortin) ELISA Kit 人阿黑皮素原Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-PKB/AKT-1 蛋白激酶B(小鼠来源抗体)Multi-class antibodies规格: 0.1ml
HIP2 泛素蛋白连接酶E2抗体 规格 0.2ml
ANG- I R(Human angiotension I receptor Antibody) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅰ受体抗体 96T
EV71 polyprotein VP1 英文名称: 肠道病毒71型/手足口病病毒抗体 0.2ml
幼兔肺成纤维样细胞说明书 UBR2 泛素蛋白连接酶E3α2抗体 规格 0.2ml
Anti-E-Selectin/FITC 荧光素标记E选择素抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-HSP27 (Ser78)/FITC 荧光素标记磷化热休克蛋白27抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-DRADA/ADAR1/FITC 荧光素标记双链RNA腺苷脱氨基酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CXCR1/IL-8RA 细胞表面趋化因子受体1抗体 规格 0.1ml
T4-BSA 状腺素T4偶联血清白蛋白 1mg
KLF1, 2, 4 英文名称: 上皮锌指蛋白1, 2, 4抗体 0.2ml
注意事项:
幼兔肺成纤维样细胞说明书实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作;每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面;
操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作;无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作;
小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。操作过程中,应避免引起aerosol之产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。
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文献和实验被忽略。 彩图6答案:成熟单核细胞。其胞质中含有许多细小、淡紫红色的风尘样颗粒,胞核看似圆形、疏松,实际上有折叠。幼稚单核细胞与成熟单核细胞经常较难区分,所以我们常常要结合周围伴随的细胞来辅助判断。另外,根据这细胞胞质的特点是有点像巨系,但其胞核染色质及核形均不像。 彩图7答案:成熟淋巴细胞。其胞核中有假核仁,这在成熟淋巴细胞中还是挺常见的,故应注意与幼稚、原始细胞鉴别。后两者胞体大些、胞质更
泛分布于动物体内能捕食固体颗粒的变形虫样游走细胞或类似的组织细胞。梅契尼可夫( E. Metch-nikoff, 1884)曾先对海星幼休和水蚤的间织细胞进行了命名。后来他证明高等脊椎动物的各种白细胞为属于同一范畴的细胞,并强调指出它起着机体的防御者和清扫者的作用。这种吞噬作用显著的细胞为嗜中性细胞(小吞噬细胞)及单核白细胞和组织细胞等的巨噬细胞。嗜酸性细胞和淋巴细胞则不显著。低等动物,诸如海绵动物、环形动物、棘皮动物等的排泄变形细胞(德 Exkretam bozyt)和环形动物
基质上培养 (贴壁或者单层培养),而另一些细胞则可在培养基中漂浮生长 (悬浮培养)。冻存如果传代时有多余的细胞,可通过适当的保护剂 (例如:DMSO 或甘油) 处理细胞,储存在 –130°C 以下的温度下 (冻存),直到需要使用之时。 培养细胞的形态 根据形状和外观 (即:形态) 可将培养的细胞分为三大类。 • 成纤维细胞 (或者成纤维细胞样细胞) 为双极或多极细胞,呈细长形,贴附在基质上 生长。 • 上皮样细胞呈多角形,尺寸更为规则,贴附在基质上呈散在斑
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