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文献和实验的纯化路线 绝招七：已知蛋白等电点，离子交换层析的选择建议 离子交换层析（Ion exchange chromatography，IEX）是基于样品表面电荷的差异来进行样品分离的方法。不同的分子表面带电荷的性质不同，包括总带电荷量、电荷密度以及表面电荷分布，会和填料之间有不同程度的互作。样品分子在一定的离子强度和 pH 条件下结合到填料上，然后通过盐/pH 梯度进行洗脱。 自然界中绝大部分蛋白的 pH 在 5.8 或 9 附近，偏酸性更多。因此，针对未知样品，一般首先推荐强阴
Fixation and Embedding of Microtubules for Electron Microscopy
and overlay pellet with glutaraldehyde solution. Fix at room temperature for ~ 1 hour. If necessary, this can be left overnight at room temperature. If the pellet is large, loosen it from the bottom of the tube by making a small wedge with a Q-tip
Rapid Screening of Chromatography Resins for the Purification of Proteins
chromatography conditions and resin to capture and release a protein secreted by Pichia pastoris . The method involves a chromatography matrix involving four resins (Q-Sepharose, DEAE-Sepharose, SP-Sepharose, and CM-Sepharose), 4 pHs from 5.0 to 8.0, and 3 NaCl
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