- 询价
- 上海研生
- YSRIBIO-C1334
- 进口
- 2025年07月15日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
Caspase-5活性测定试剂盒价格
- 英文名：
Caspase-5 Activity colorimetric assay Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
20T|50T|100T
1．Caspase-5活性测定试剂盒价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称：Caspase-5活性测定试剂盒价格英文名称：Caspase-5 Activity colorimetric assay Kit
产品规格：20T|50T|100T
发货周期：1～3天
本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-5活性。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA)，释放出游离的硝胺pNA，后者呈黄色在405nm具有最大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定，吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。
细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD，与ICE有51%的同源性，在过量表达时可诱导凋亡发生。
所需仪器酶标仪与96孔酶标板；或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长最大吸收波长405nm，如不具备也可在400～450nm范围内测定。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
2-氧-6-羧酯嗪DL-精/DL-蛋白/DL-胍/DL-Arginine
Moexipril HClN-酰-L-谷酰/茶/N-Acetyl-L-Glutamine
Nafamostat MesylateS-羧-L-半胱/羧司坦/S-羧半胱/S-Carboxymethyl-L-Cysteine
Ostarine状旁腺激素PTH1-84/副状腺素/PTH/Parathyroid/Parathormone
R406 (free base)L-状腺素/(2S)-2--3-4-(4-羟-3,5-二-氧)-3,5-二/L-状腺/3,5,3′,5′-四状腺-L-原/左旋状腺素/L-腻，3，5-四状腺/L-thyroxine sodium
CanagliflozinL-状腺素/O-(4-羟-3,5-二)-3,5-二-L-酪/3,5,3′,5′-四-L-状腺原/3-4-(4-羟-3,5-二氧)-3,5-二-L-/T4
AT7519L-肌肽/N-β-酰-L-组/β--L-酰组/L-Carnosine
Bitopertin组/组盐/二组织/Histamine diphospate
Enalaprilat Dihydrate还原型谷胱甘肽/L-还原型谷胱甘肽/Glutathione reduced/GSH
Alvelestat型谷胱甘肽/Glutathione oxidized/GSSG
Caspase-5活性测定试剂盒价格Ammonium paratungstate仲钨铵11120255
METHACHOLINE BROMIDE溴酰β胆333313
2Methyl4trifluoromethylthiazol5ylamine24三5噻唑
28deMethyl βaMyrone28去β香树脂
NCARBOBENZOXYDLPHENYLALANINECBZDL3588576
Cetrimide十四三溴铵1119977
Methyltriacetoxysilane三酰硅4253343
2(1Cyano1methylethyl)azocarboxamide1((1)偶)酰10288285
Germacr1(10)ene5,8dione莪术二13657686
2,4,6Trichlorobenzonitrile2,4,6三1707639
Rapamycin雷帕霉素53123889
TRIS(3(HEPTADECAFLUOROOCTYL)PHENYL)三[3(七)]325459914
CHLOROPHYLL A叶绿素 A479618
CROCIN西红花苷42553651
N,NDIETHYLACRYLAMIDEN,N二2酰2675947
胸腺肽a1（套） 订购|咨询 规格 2mg
紫杉 订购|咨询 规格 30mg
利巴韦林 36791045 订购|咨询 规格 约25mg/支
黄山药皂苷提取物 订购|咨询 规格 200mg
钙 订购|咨询 规格 100mg
拉坦 7491749 订购|咨询 规格 100mg
芥 订购|咨询 规格 1ml
拉明 147240 订购|咨询 规格 100mg
没药(胶质没药) 订购|咨询 规格 0.5g
细叶远志皂苷 订购|咨询 规格 20mg
环壬 订购|咨询 规格 50mg
赖 订购|咨询 规格 50mg
仙茅 订购|咨询 规格 2g
4[2(5嗪2酰） 订购|咨询 规格 50mg
羟 订购|咨询 规格 100mg
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验发光基团pNA游离出来，可通过酶标仪或分光光度计（λ=405nm 或400nm）测定其吸光值，通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1．准备工作： A、 裂解液溶解后混匀，冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备：每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT，冰浴备用。 2．样本处理： A、悬浮细胞 1） 诱导完成后的细胞，2000 rpm离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS轻轻重悬细胞并计数
。试剂盒比较便宜，KeyGene公司有。 2. 流式细胞法，只要有流式细胞仪，买来试剂盒按照说明操作即可，优点是可以同时检测多种caspase的活性。价格较贵。 3. WB的方法，比较繁琐，通过半定量比较活化caspase蛋白（即裂解的小片段）的量判断活性强弱。 选择哪种方法根据实验要求和条件，1或2同3的联合使用，应该最能说明问题。附件是流式法的一个说明书，个人见解仅供参考。 yqsqzr 那是否可以通过流式
。Caspase-3 正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的 Caspase-3 由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase 的活性明显下降。➤ 研究方法1. 分别使用 RIPA 和 2%SDS + 超声提取未激活 T 淋巴细胞（Lanes 1 和 5）和激活的 T 淋巴细胞（Lanes 2-4 和 6-8）裂解细胞提取总蛋白2. WB 进行 caspase
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
